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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负80度
- 保质期:
3年
- 英文名:
pBI121-mCherry植物表达质粒
- 库存:
100
- 供应商:
上海柯雷生物
- 规格:
20ul
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文献和实验。 GhVP 基因的亚细胞定位 将构建好的 pBI121-GhVP∷GFP 载体用金粉包裹,把金粉包裹好的质粒加入基因枪 GDS-80 轰击洋葱内表皮细胞, 在激光共聚焦显微镜下观察。可以看出,空载体 pBI121-GFP 转化洋葱表皮后, 在整个洋葱细胞均能看到绿色荧光。pBI121-GhVP∷GFP 转化洋葱后,VP 蛋白定位于洋葱表皮细胞的细胞膜上,在玻片上加蔗糖,待质壁分离后,GhVP 蛋白在洋葱表皮细胞的细胞膜和细胞间质中均有分布(图3)。结果表明 GhVP 蛋白是 1 个跨膜蛋白, 与细胞
121 在文献"香蕉 Maasr1 基因 RNAi 植物表达载体的构建及鉴定.热带作物学 报, 2009 年, 30 (3) :333-337. "中公开过,公众可从中国农业科学院棉花研究所抗逆鉴定课 题组实验室获得。基因枪为美国 WEALTEC 的基因枪 GDS-80 。非抗虫棉花材料沪 749513 在文献"高频体细胞胚胎发生的优异棉花种质材料筛选.分子植物育种, 2012 ,10 (6) ,683-688. "中公开过,公众可从中国农业科学院棉花研究 所抗逆鉴定课题组实验室获得。 实施例
荧光检测选取以上检测到的花粉自发绿色荧光弱的材料,用基因枪将带有 pBI121-CA::GFP的质粒活体转化至棉花花粉,再次观察绿色荧光现象和强度,步骤如下: (1)载体质粒的提取:将带有 pBI121- CA::GFP 质粒的大肠杆菌接种到含有卡那抗生素的 LB 液体培养基中,37℃,175rpm 过夜培养,根据 OMEGA 质粒大提试剂盒操作步骤进行质粒提取,并琼脂糖电泳检测条带,测浓度备用。 (2)金粉处理(60mg/ml):首先取 30mg 金粉置于 1.5ml 离心管中,加 1ml70%乙醇
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