pRed-FLp线虫同源重组编辑质粒

过表达都是相似的，敲除的方法却很多

和RecBCD蛋白组成，在基因敲除时必须以环状质粒存在）、结合转化敲除系统及温度敏感型质粒敲除系统等可供选择。   2 FLP-FRT系统和Cre-loxP系统 这两个系统都是位点特异性重组酶系统，其中FLP-FRT源于酿酒酵母，Cre-loxP源于F1噬菌体。两个系统的基本原理类似。以Cre-loxP系统为例，该系统含有两种成分：第一个部分是一段长34 bp的重组酶识别的DNA序列（loxP），其中含有两个13 bp的反向重复序列和一个8 bp的核心序列；第二个是Cre

质粒构建及提取概述

1、质粒的概念 质粒（Plasmid）是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子，能够独立于宿主染色体进行自我复制，并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因（如抗生素抗性基因）。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型，如用于保存序列信息的克隆质粒（如：pUC 系列质粒），用于表达蛋白的质粒（如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒），用于基因编辑的质粒（如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A

诺奖得主 Science 发文：基因编辑诞生 10 年，未来将如何改变世界？

程的基因组编辑工具。（A）CRISPR 免疫系统靶向微生物中的 DNA 或 RNA。（B）CRISPR-Cas9 是用于 RNA 引导的遗传操作的规范基因组编辑工具。（来源：Science） CRISPR 诱导的基因敲除 CRISPR-Cas9 具有高靶向特异性和有效性，能够成功快速创建敲除小鼠和其他动物模型（图 2B）。传统的基因靶向方法需要在胚胎干细胞（ES）中使用低效的同源重组，然后费力地筛选修饰的 ES 细胞以获得所需的序列变化并注射到胚胎中。而 CRISPR-Cas9 能够在单细胞