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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负80度
- 保质期:
3年
- 英文名:
pQE-80L大肠表达质粒
- 库存:
100
- 供应商:
上海柯雷生物
- 规格:
20ul
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文献和实验蛋白是相当重要的;同时可以纯化出那些完整表达的蛋白,一些在翻译过程中容易造成“暂停”现象的蛋白就不用怕纯化产物里含有不完整的产物。融合了6×组氨酸标签的有pQE-60和pQE-70,融合了6×His-DHFR的有pQE-16。 顺式抑制载体 pQE系列的表达载体一般情况下需要在M15菌株中进行表达的,但是设计的pQE80L系列就没有这种约束,它可以在任意大肠杆菌株中进行表达。这与一般的pQE载体利用M15中质粒pREP4的反式lacI抑制子调控不同,它是利用顺式lacIq调控产生大量lac抑制
蛋白;如果是纯化过程中蛋白易降解,则可以在纯化试剂中加入甘油以及蛋白酶抑制剂,并且确保整个操作在4度完成。 2、如何在E. coli中表达高度毒性的蛋白? 在E. coli中表达高度毒性的蛋白往往是很困难的。毒性基因表达‘泄漏’会杀死宿主菌,尤其在早期的生长或转化后,可以使含有突变的不表达质粒的细菌选择性生长。因此,要表达高毒性的蛋白,需要更高水平的lac 抑制蛋白。推荐同时使用QIAGEN公司的pQE-80L系列表达载体和M15[pREP4]宿主菌。pQE-80L系列表达载体带有lac抑制子基因,宿主
-16、pQE-40,使生成目标多肽与DHFR的融合蛋白;如果是纯化过程中蛋白易降解,则可以在纯化试剂中加入甘油以及蛋白酶抑制剂,并且确保整个操作在4度完成。 2、如何在E. coli中表达高度毒性的蛋白? 在E. coli中表达高度毒性的蛋白往往是很困难的。毒性基因表达‘泄漏’会杀死宿主菌,尤其在早期的生长或转化后,可以使含有突变的不表达质粒的细菌选择性生 长。因此,要表达高毒性的蛋白,需要更高水平的lac 抑制蛋白。推荐同时使用QIAGEN公司的pQE-80L系列表达载体和M15
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