pTA7002-avrPto番茄基因质粒

植物基因转化常用方法

醛酸酶，使果实开始软化。运输过程中，造成伤害，降低了商品品质。 b)多聚半乳糖醛酸酶基因 在1980s中期，ICI种子公司的生物技术部与Nottinghan大学合作进行了实验。从正常多聚半乳糖醛酸酶基因的5’端获得了一个730bp的限制性片断，包含了一半的编码序列，将植物的多腺苷酸化信号连接到片段的头部，CaMV启动子连接到尾部，插入Ti质粒pBIN19中。引入植物后，转录后形成了反义RNA 。降低了多聚半乳糖醛酸酶基因的表达。 图11-29 延迟成熟番茄的构建过程三 病毒介导的遗传

三种植物基因克隆的策略与方法

已分别克隆到拟南芥菜、番茄、水稻等植物中的有关抗病基因(Martin等，1993;Bent等，1994;Mindrinos等，1994;Wenyuan等，1995) 。Martin等1993年最早用定位克隆技术克隆出番茄pto基因，pto基因负责对带有无毒基因Avrpto的细菌，丁香假单胞菌(pseudomonas syringae pv)菌株的抗性，Pto基因导入感病番茄后转基因植株增强了对病原菌的抗性(Martin等，1993)。Wenyuan等1995年用这一技术克隆了水稻Xa21基因，Xa21基因

基因组编辑技术应用于作物遗传改良的进展（上篇）

9 系统具有构建简单、编辑效率高、容易实现多基因编辑等优势，现已成为应用最广泛的基因组编辑技术，在作物遗传改良和品种培育上具有重大应用潜力。目前，CRISPR/Cas9 技术已成功应用于多种作物如水稻、玉米、小麦、大豆、番茄、柑桔和蘑菇的重要农艺性状遗传改良。1.4 CRISPR/Cpf1 技术及其应用CRISPR/Cpf1 隶属于 II 类 typeV-ACRISPR 系统，是迄今发现最简单、有效的 II 类 CRISPR/Cas 系统。CRISPR/Cpf1 特异切割 DNA 双链的原理