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- 2025年08月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负80度
- 保质期：
3年
- 英文名：
pPH37酵母基因质粒
- 库存：
100
- 供应商：
上海柯雷生物
- 规格：
20ul
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文献和实验。对低拷贝数质粒，提取时可加大菌体用量并加倍使用溶液P1、P2 和 P3，可以有助于增加质粒提取量和提高质粒质量。 13. 溶液使用不当： 溶液 P2、P3 在温度较低时可能出现浑浊，应置于 37℃ 保温片刻直至溶解为清亮的溶液，才能使用。 14. 吸附柱过载： 不同产品中吸附柱吸附能力不同，如果需要提取的质粒量很大，请分多次提取。若用富集培养基，例如 TB 或 2×YT，菌液体积必须减少；若质粒是非常高的拷贝数或宿主菌具有很高的生长率，则需减少 LB 培养液体积。 15. 质粒未全部溶解
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酶活性；2. 10×CIP 缓冲液和 1U CIP，混合后，37 ℃ 孵育 30～60 min，然后 75 ℃ 加热 15 min 灭活 CIP 活性；3. 琼脂糖凝胶电泳分离并纯化目的 DNA 片段用于连接反应。（二）连接反应【实验试剂与器材】1. T4 DNA 连接酶2. 10×T4 连接酶缓冲液【实验方法与步骤】反应体系：质粒 DNA (0.5(g/? 滋 l) 2? 滋 lDNA 插入片段 (300ng/? 滋 l) 5? 滋 l10× 连接缓冲液 1? 滋 lT4 DNA 连接酶 1? 滋 l加水
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