pSV40-Ftl1-m-C365T小鼠基因质粒

细胞转染的步骤你了解多少？

细胞系等，该细胞有一定自发转化倾向，一般在转染前一天接种细胞，接种密度为2×104 /cm2 ,用含10%胎牛血清的DMEM液，37℃、5%CO2 培养，待细胞占50～70%瓶底面积时，用于转染试验。 (3)DNA-磷酸钙沉淀物的制备 ①将供体细胞DNA和PSV2-neo质粒载体DNA用TE配制成40mg/L的DNA溶液，同时向供体细胞DNA液200μl中加入带基因neo质粒DNA液(20mg/L)220μl和2×HBS 250μl(PSV2-neo为1～2mg/L的使用量)。 ②取500μl上述

基因转染实验(磷酸钙－DNA共沉淀法)

DNA制备：方法按前介绍的DNA提取法提取，溶于TE中，40mg/L。（2） 受体细胞的培养：研究癌基因转移应选择不含人类Alu序列的动物细胞系作为受体细胞。如小鼠NIH3T3胚成纤维细胞系等，该细胞有一定自发转化倾向，一般在转染前一天接种细胞，接种密度为2×104/cm2，用含10%胎牛血清的DMEM液，37℃、5%CO2培养，待细胞占50~70%瓶底面积时，用于转染试验。（3）DNA－磷酸钙沉淀物的制备①将供体细胞DNA和PSV2-neo质粒载体DNA用TE配制成40mg/L的DNA溶液

让肿瘤变「热」！宋尔卫院士团队Nat Immunol发文报道肿瘤免疫治疗新策略

ImmunologyRGS1 的表达受什么因素调控？为了进一步探索 CTL 和 Th1 细胞中 RGS1 上调的机制，作者构建了一系列包含 RGS1 上游 5'-侧翼序列连续截短的报告质粒，将其电转到人类 T 细胞系 Jurkat 中，并用植物血凝素（PHA）刺激活化细胞。作者观察到，从 RGS1 转录起始位点上游 -2000 bp 到 -200 bp 的序列缺失不会影响 PHA 诱导的荧光素酶表达，而删除到 -150 bp 则完全消除了 PHA 的诱导作用。先前的研究表明 IFNγ-STAT1 通路在 CTL