一管式TMB显色液(沉淀型)

特别提示：包括一管式TMB显色液(沉淀型)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：一管式TMB显色液(沉淀型)
英文名称：One-Tube TMB Solution
产品货号：BTN91101B
产品规格：100mL

TMB(四甲基联**)是辣根过氧化物酶（Horseradish Peroxidase、HRP）的显色底物，在辣根过氧化物酶和H2O2存在时，TMB 会产生可溶性蓝色产物（光吸收在370nm），加入硫酸后，溶液呈黄色，此时可以在450nm 测定吸光度，因此TMB和H2O2一起常用于检测HRP的存在。跟HRP的其他底物（如ABTS和OPD）相比，TMB不但灵敏，而且无毒，所以在ELISA 中的应用日趋广泛。传统的TMB显色试剂一般由两个组份组成（另一个是H2O2），必须在使用前新鲜配制，并且容易产生沉淀，使用相对不太方便，并且也容易导致操作误差。为克服这些缺点，本公司开发了只有一个溶液的一管式TMB 显色液

产品特点：
1. 即开即用，操作简单，用户不需要配制任何溶液。
2. 显色液只是单一溶液，简化了操作步骤，降低了操作误差，结果更加稳定。
3. 既可用于ELISA 等的显色液，也可以用于检测血液或血红蛋白等样品中的过氧化物酶含量。
4. 该底物溶液含TMB、H2O2和特殊的稳定剂，可以在4℃长期放置。
5. 分沉淀可溶型（BTN91101A型，适用于ELISA）和沉淀不可溶型（BTN91101B型，适用于Western印迹膜免疫检测）两种。

保存条件：2-8℃避光保存，有效期一年。

使用方法：
1. 将已经用封堵液、一抗和二抗处理的Western 膜用自备的PBS 缓冲液洗涤一次。封堵液、一抗和二抗的处理同常规方法。
2. 将膜浸入本产品（B 型）中，室温摇晃5-30分钟，并在颜色达到所需深度时候将Western 膜取出以终止反应。

除了一管式TMB显色液(沉淀型),，我公司还供应以下相关产品：



名称：Western一抗二抗清除剂(强碱性)
货号：YT071
规格：250ml
本品用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后，有时还需要检测tubulin、actin等表达量相对稳定的蛋白作为参照，或检测其它蛋白进行比较。通过使用一抗二抗去除液，充分去除一抗二抗，可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE胶相比，不仅省时省力，而且可以消除重新上样而带来的误差，使可比性更强。

使用Western一抗二抗去除液多次重复使用同一张膜，会导致蛋白信号的减弱。但是，本Western一抗二抗去除液，经过多个抗体的检测试验，通常可以重复利用膜3-5次。使用本试剂只需大约15-20分钟即可实现蛋白膜的重复使用，然后可以进行封闭等后续的Western操作。

百奥莱博的不同的Western一抗二抗去除液主要在去除结合的一抗二抗的原理方面略有不同。分别依靠去垢剂、酸性、碱性、还原剂、螯合剂、盐浓度以及一些特殊试剂等的不同组合来解除一抗二抗的结合，同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失。

抗体清除剂选型表：

产品编号	YT071	YT072	YT073	YT074
产品名称	Western一抗二抗清除剂(强碱性)	Western一抗二抗清除剂(弱碱性)	Western一抗二抗清除剂(中性)	Western一抗二抗清除剂(酸性)
产品包装	250ml	250ml	250ml	250ml
pH	强碱性	弱碱性	中性	酸性
对于膜上蛋白的保留效果	好	好	好	好
对于一抗二抗的去除效果	好	好	好	好
去除一抗二抗所需时间	15-20分钟	20-30分钟	20-30分钟	40-80分钟
适用膜的类型	PVDF和NC	PVDF和NC	仅PVDF	PVDF和NC
腐蚀性	强	弱	无	弱

用于普通的Western检测时蛋白膜上一抗二抗的去除可以任选一种去除液。如果是NC膜，即硝酸纤维素膜时，不宜选用YT071N。从时间角度考虑，强碱性、弱碱性和中性的去除液所需的时间都比较短，可以优先考虑。从价格因素考虑，强碱性的去除液性价比最高。从安全性考虑，中性的去除液由于没有腐蚀性而表现出更高的安全性。弱碱性和弱酸性一抗二抗去除液的安全性次之。但只要正确操作，并进行适当防护，使用强碱性的一抗二抗去除液也是完全可行的。
　　对于特定的抗原和抗体，很难说哪一种Western一抗二抗去除液的效果最好。在遇到一抗二抗去除效果欠佳时，可以考虑适当延长一抗二抗去除液的孵育时间，同时确保孵育时的温度不低于20℃。温度过低时一抗二抗的去除效果会下降。同时也可以考虑尝试其它的一抗二抗去除液，以摸索出最佳的适合您实验条件的Western一抗二抗去除液。

注意事项：
1. 使用辣根过氧化物酶(HRP)，任何一次封闭(blocking)都应当使用5%脱脂牛奶，如果使用碱性磷酸酯酶，任何一次封闭都应当使用酪蛋白。
2. 为取得最佳效果，推荐使用PVDF膜。但硝酸纤维素膜也可以使用本Western一抗二抗去除液。
3. 使用化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western检测，例如DAB，NBT/BCIP，不适用于本试剂。
4. 本Western一抗二抗去除液有轻微腐蚀性，使用时请注意防护。

储存条件：室温，有效期一年。