WB转印滤纸(12.5cm×12.5cm，100张/包)

特别提示：包括WB转印滤纸(12.5cm×12.5cm，100张/包)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：WB转印滤纸(12.5cm×12.5cm，100张/包)
产品货号：ZN1897
产品规格：100张

Western Blotting快速高效蛋白转移垫
产品保存：常温保存，一年有效
产品说明：
Western blot 技术是在研究实验室常规和通用的一项技术，其伴有三个主要缺点。第一，转移蛋白至蛋白结合膜花费时间太长; 第二，转移效率不恒定; 第三，转移高分子量蛋白会出现一些问题。其它的缺点包括 ：转移设备过热，由于电流过大引起电能不足和印迹三明治组装杂乱等。
根据顾客长期反馈的要求，目前向科研工作者推出 快速高效转移垫，能够有效解决上述的问题．每块转移垫减少转移时间大于 50%,并且持续高效率的转移。该项产品在不影响转移效率的前提下，允许使用较低浓度的转移缓冲液，从而避免了过热和电能不足。本转移垫在技术上结合了半干转移的方便和湿转的高效性，明显减少了缓冲液的使用量。
选用此有效垫，确保了你的Western blot 高度有效，快速简便,避免了大分子蛋白转移过程引起的各种问题。

除了WB转印滤纸(12.5cm×12.5cm，100张/包),，我公司还供应以下相关产品：



名称：Western一抗稀释液(WB一抗稀释液)
货号：YT066
规格：100ml
本品可以用于Western时一抗的稀释和配制。使用本Western一抗稀释液稀释和配制的一抗可以在4℃保存和使用不少于六个月，可以反复多次用于Western，节约您宝贵的抗体。按照每个一抗稀释10毫升计算，一个包装的Western一抗稀释液可以稀释10个或10次一抗。

注意事项：为了能使抗体可以反复多次使用，建议尽量在4℃进行一抗和蛋白膜的结合反应，以减缓一抗的衰减速度。

储存条件：4℃，有效期一年。

名称：SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(非变性)(2×)
货号：ZN1879
规格：1ml×6
产品保存:-20℃一年有效、
产品说明：
蛋白上样缓冲液2×(非变性非还原),是一种以溴酚蓝为染料的2倍浓缩液的蛋白上样缓冲液，试剂中不含有 SDS，DTT。可用于非变性的蛋白样品上样及其它分析。
使用说明：
1．按照1体积蛋白样品加入1体积蛋白上样缓冲液即1：1的比例混合，即可上样，电泳。
2．通常电泳到当溴酚蓝染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。

名称：彩色预染超高分子量蛋白质标准(10-20次)
货号：ZN1883
规格：100μl
产品保存：-20℃保存，一年有效。
产品特点：
锐利且稳定的颜色。
多种颜色 – 易于凝胶中示踪。
即用型上样 – 无需煮沸。
免疫印迹转膜效果好。
产品应用：
监控 SDS-PAGE 凝胶中的蛋白迁移。
检验免疫印迹转膜效率。
SDS-PAGE 凝胶和免疫印迹杂交膜上蛋白大小的粗略鉴定。
未染色预制胶中待切割目标蛋白的定位。
产品说明：
彩色预染超高分子蛋白质 marker 特异性用于大分子蛋白分析。其含有 8 种重组的高纯度蛋白，表观分子量范围43-315kDa。这些蛋白采用3种不同的染料分别染色。彩色预染超高分子蛋白质marker是即用型产品，使用前无需加热、稀释或变性剂处理。
使用方法：
1.室温或37℃融化 Ladder 几分钟，确保试管中的固体完全溶解，不要煮沸。
2.轻轻混匀，确保溶液完全混匀。
3.上样：
小凝胶：5μl/泳道，凝胶厚度 0.75-1 mm。
大凝胶：10μl/泳道，凝胶厚度 1-1.5 mm。

名称：Western Blotting DAB显色法检测试剂盒(黄色)(兔IgG)
货号：ZN1933
规格：1盒
工作原理：聚合标记法是一种酶标记方法，其敏感性比普通酶标法有明显提高。用于 Western Blotting的免疫学检测，更能体现其优点。不仅能大量地节约一抗，更重要的是使条带更清晰，甚至能检测出普通酶标法无法检测出的微量条带。DAB 是过氧化物酶最重要的显色剂之一，反应产物为不溶于水、二甲*和醇的棕色沉淀物，适合于免疫印迹的显色反应。本产品采用特殊配方，具有操作简单，储存稳定，信号灵敏度高，持续时间长，背景低，结果易保存等优点。
保存条件：－20℃冷冻保存。DAB 显色试剂应避光保存。
有效期：一年。
试剂盒的内容：
(1)封闭试剂：10 g 蛋白干粉×2 包。
(2)浓缩抗体稀释液：20 ml×1 瓶，为10倍浓缩液。
(3)聚合过氧化物酶标记山羊抗兔IgG0.2ml，效价 1：200-400。亲和纯化抗体，经聚合法标记过氧化物酶。
(4)DAB 显色试剂，含：
显色剂 A：DAB×40倍浓缩液，3ml。
显色剂 B：H2O2×40倍浓缩液，3ml。
显色剂 C：×40倍 TBS 浓缩缓冲液，3ml。
使用说明 需要而未提供的试剂和器材：
1．转印了蛋白样品的NC 膜或PVDF 膜：通过 SDS-PAGE 凝胶电泳分离蛋白质抗原，将 PAG 胶上的蛋白质转印到硝酸纤维素膜(NC 膜)或PVDF 膜上。
2．稀释缓冲液：使用中性稀释缓冲液即 0.02 M PBS或0.02M TBS(AR0144)配制封闭液和抗体稀释液。0.02 M PBS(pH7.2-7.6)：1000 ml 蒸馏水加 Na2HPO4 2.8 g ，NaH2PO4 0.4 g，NaCl 8.5 g。如果用的是含水磷酸盐，应加上分子式中水的含量。0.02M TBS(pH7.2-7.6)：1000ml 蒸馏水中加 Tris 2.42g,NaCl 9g; 纯乙酸或浓盐酸调节 pH 值(7.2-7.6)。
3．洗涤缓冲液：每 1000ml 中性稀释缓冲液中加入 0.5 ml Tween20 即可。
4．一抗：选择适合的一抗，用抗体稀释液稀释相应的一抗，一般特异性抗体工作浓度为1μg/ml,具体的稀释度取决于特异性的一抗和膜上的抗原的量。
5．摇床：膜的封闭、抗体孵育和洗涤都需平稳摇晃，需在摇床上操作。
6．相机：记录结果。
操作程序：
1．通过聚丙*酰胺凝胶电泳分离蛋白样本和分子量标准。
2．将蛋白样本转移至硝酸纤维素膜或PVDF 膜上。
3．封闭硝酸纤维膜：用封闭蛋白干粉 2 g,加稀释缓冲液 100 ml，20-37℃封闭 1-2 小时。用量以浸没整张膜为准。
4．用洗涤缓冲液洗涤硝酸纤维素膜 5分钟,1次。
5．配制抗体稀释液：取 90 ml 稀释缓冲液加 1 g 封闭蛋白干粉和 10 ml浓缩抗体稀释液即可。一抗、二抗均用此稀释液稀释。
6．硝酸纤维膜孵育一抗：用抗体稀释液稀释相应的一抗，一般特异性抗体浓度 1μg/ml,20-37℃孵育2 小时左右。如果缺乏特异性的条带或阳性不强，应提高一抗的浓度；如果有非特异性的条带，应提高一抗的稀释度。
7．用洗涤缓冲液振荡洗涤硝酸纤维素膜 3次,每次 5分钟。
8．硝酸纤维膜孵育二抗：用抗体稀释液稀释相应的酶标二抗，效价 1：200-400。37℃孵育一个半小时左右。用户可根据实际染色情况对稀释度做适当调整。
9．用洗涤缓冲液振荡洗涤硝酸纤维膜 4次,每次 5分钟。
10．DAB 显色:使用 DAB 显色试剂。按每 2 ml 蒸馏水加显色剂 A，B，C 各１滴，混匀。混匀后加至膜上。室温显色。一般显色 1－30分钟。
若无背景出现则可继续显色。显色后用蒸馏水洗涤以终止反应。
11．观察，照相。
注意事项：
1．试剂频繁使用时置４℃，不常使用时置－20℃。显色剂 A 需置－20℃冷冻保存。如有结晶析出，应确保结晶完全溶解再行使用。
2．显色工作液应新鲜配制。