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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
358
- 英文名:
5×SDS-PAGE loading buffer(With 25% Glycerol)
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
- 规格:
1ml
特别提示:包括5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(25%甘油)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(25%甘油)
英文名称:5×SDS-PAGE loading buffer(With 25% Glycerol)
产品货号:KFS080
产品规格:1ml
本产品作为蛋白质电泳Loading Buffer,适用于变性聚*烯酰胺凝胶电泳时的蛋白样品制备和上样。蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE loading buffer)是一种以溴酚蓝为染料,5倍浓缩的SDS-PAGE 凝胶电泳上样缓冲液,用于常规的SDS-PAGE蛋白电泳样品上样。
操作步骤
1. 按每4 微升蛋白样品加入1 微升5×SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液的比例,混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(5X)。
2. 100℃或沸水浴加热5 分钟,以充分变性蛋白。
3. 置冰上5 分钟,10000rpm 离心1 分钟,取上清直接上样到SDS-PAGE 胶加样孔内即可。
储存:2~8℃,有效期12个月。
除了5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(25%甘油),,我公司还供应以下相关产品:
名称:L-谷胱甘肽(还原型)
货号:BTN120705
规格:5g
还原型谷胱甘肽是人类细胞质中自然合成的一种肽,由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成,含有巯基(-SH),广泛分布于机体各器官内,作为一种抗氧化剂,可以保护肝脏细胞膜,增强肝脏的解毒能力,为维持细胞生物功能呈有重要作用。本产品可用于配制纯化GST标签蛋白的洗脱液。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期两年。
名称:SDS-PAGE凝胶配制试剂盒
货号:KFS074
规格:50 块胶
SDS-PAGE凝胶配快速制试剂盒提供了配制 SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制 PAGE凝胶。本试剂盒约可配制 50块常规大小的 PAGE胶(即聚*烯酰胺凝胶)。
注意事项1.过*酸铵配制成10%溶液后,应尽快用完并-20℃保存,若 4℃放置则不要超过一个星期。尽量现配现用。
2. TEMED宜挥发,使用后请盖紧瓶盖,并保证避光保存。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切,可通过适当调节 TEMED的用量,控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。 3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存:2~8℃,有效期12个月。
名称:组织线粒体蛋白提取试剂盒
货号:HR0143
规格:50T/100T
线粒体蛋白提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种动物实体组织,如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等动物组织中提取线粒体蛋白。提取过程简单方便。制备的线粒体蛋白不仅纯度高,保持天然活性,而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。
本试剂盒提取的蛋白不可用于2D电泳。如下游实验需要用于2D电泳,请使用货号的试剂盒。
储存条件:线粒体试剂AB 于2-8℃保存,长期存放于-20℃保存;蛋白裂解液C室温保存;蛋白酶抑制剂-20℃保存。
有效期:一年。
注意事项:
●本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
产品特点:
1.使用方便,将蛋白提取的时间缩短至 30分钟-1小时。
2.含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
3.紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
4.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
试剂盒以外自备试剂和仪器:
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ●冰箱,冰盒
使用方法:
使用注意事项:
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
● 最好使用 Dounce匀浆器匀浆,如果没有Dounce匀浆器,用普通1ml玻璃匀浆器匀浆也可。也可采用超声破碎的方法,建议功率30w,10s。采用普通匀浆器或超声破碎,建议镜检,保证细胞80%以上的破碎率。
1.提取液准备:每 200μl试剂C中各加入2μl蛋白酶抑制剂混合物混匀备用。
2.取50-100mg组织样本用剪刀尽可能剪碎。
3.用冷 PBS 洗涤两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
4.加入 300μl冷的试剂A,置冰上10分钟。
5.Dounce 匀浆器匀浆30-40下,然后在4℃,500×g条件下离心5分钟。
6.快速将上清吸入另一预冷的干净离心管。
7.在 4℃,11000×g以上条件下离心20分钟。
8.在沉淀中加入300μl冷的试剂B,混匀。
9.在 4℃,11000×g以上条件下离心20分钟。。
10.弃上清。
11.在沉淀中加入 80μl-150μl裂解液C,振荡20分钟。(如无振荡条件,也可置冰上20分钟,每隔5分钟高速涡旋振荡15秒。)
12.即得线粒体蛋白。
13.将上述蛋白提取物定量①后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验②。
【注】:
① 建议用BCA 法进行蛋白定量。
②蛋白样品-80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉,不要被细菌污染。
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文献和实验一般先配制50倍的TAE缓冲液,用时再稀释成1倍的。 50倍TAE缓冲液的配制方法为 1. 称取下列试剂于1L烧杯中: Tris 242g Na2 EDTA.2H2 O 37.2g 2.向烧杯中加入约600mL的去离子水,充分搅拌溶解
又称甘油三酯( triglyceride),是 1分子甘油和 3分子脂肪酸结合而成的酯。各种三酰甘油的区别在于所含脂肪酸残基是否相同和它们的位置。若 3个脂肪酸皆相同,则称单纯甘油酯;若有所不同,称为混合甘油酯。动植物的脂肪和油是单纯甘油酯和混合甘油酯的复杂混合物,其脂肪酸组成随生物的不同而变化。脂肪和油的区别仅在于前者在室温下为固体,后者在室温下为液体。植物油的熔点低于动物脂肪,说明植物油含有的不饱和脂肪酸比动物脂肪多。三酰甘油是动物的能量贮备,因此尽管它不是膜的成分
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