- ￥317 - 407
- 凯基
- 江苏
- KGA1339
- 2026年09月23日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温
- 供应商：
臻诺生物
- 规格：
100 tests
凯基Maxima SyberGreen Real-time PCR试剂盒KGA1339
✅ 基础信息
- 货号：KGA1339（100 次反应）；KGA1339-1（500 次反应）
- 品牌：KeyGEN 凯基生物
- 产品形态：2× 预混液，SYBR Green I 嵌合荧光法 qPCR
- 储存：-20℃避光，有效期 12 个月；避免反复冻融，建议分装保存凯基生物
- 核心组分：3 种单克隆抗体封闭热启动 Taq 酶、优化双阳离子缓冲液、SYBR Green I、dNTP、PCR 增强稳定剂；配套ROX 参考染料 + 无酶水凯基生物
| 组分 | KGA1339（100T） | KGA1339-1（500T） | 储存 |
|---|---|---|---|
| SYBR Green Master Mix (2×) | 1 mL | 5×1 mL | -20℃避光 |
| ROX 染料 | 40 μL | 200 μL | -20℃ |
| 无酶水 Nuclease Free Water | 1 mL | 5 mL | -20℃ |
🎯产品特点
- 三抗体热启动 Taq：室温封闭酶活，抑制引物二聚体、非特异扩增，特异性好
- 双阳离子优化缓冲体系：扩增效率高，重复性稳定
- 配套 ROX I/II：可匹配 ABI、Agilent 等需要参比染料机型，校正孔间荧光差异；Roche、BioRad 等机型可不加 ROX
- 通用性强：适配 ABI、Roche、Bio-Rad、Eppendorf、Corbett 等绝大多数 qPCR 仪器
- 应用场景：cDNA 基因表达定量、质粒 / 基因组 DNA 定量、熔解曲线分析（两步法 / 三步法 qPCR，两步 RT-qPCR，非一步逆转录 qPCR）凯基生物
🧪推荐 20 μL 标准反应体系
| 组分 | 体积 | 终浓度 |
|---|---|---|
| 2×SYBR Green Master Mix | 10 μL | 1× |
| Forward Primer（10 μM） | 0.4 μL | 0.2 μM |
| Reverse Primer（10 μM） | 0.4 μL | 0.2 μM |
| 模板 cDNA/gDNA/ 质粒 | 按需添加 | - |
| ROX（50×，按需） | 0.4 μL | 1× |
| 无酶水 | 补至 20 μL | - |
模板参考用量：gDNA 10 pg～1 μg；质粒 10 ~ 10⁷拷贝；冰上配体系，配完短暂离心。
循环程序参考
- 预变性：94℃ 30 sec（热启动激活，必须）
- 两步法（推荐）：
94℃ 5 sec → 60℃ 30 sec，40~45 个循环；60℃采集荧光
- 循环结束执行熔解曲线，判断产物特异性
引物 Tm 偏低、模板浓度低，改用三步法：94℃5s → 50–60℃退火 →72℃延伸
ROX 选型匹配机型
- ROX I：ABI 7000/7300/7700/7900、StepOne / StepOnePlus
- ROX II：ABI7500/7500Fast、ViiA7、QuantStudio 系列、Agilent Mx3000P
- 不加 ROX：Roche LC480/LC96、Bio-Rad、Corbett Rotor-Gene 等
⚠️关键注意事项
- 试剂避光操作，Master Mix 不要剧烈震荡，轻柔颠倒混匀防气泡
- 产物片段建议100–150 bp，不超过 500 bp，减少非特异
- NTC 阴性对照必须设置，排查引物二聚体与污染；推荐滤芯枪头防气溶胶污染
- 仅用于科研，不能用于临床诊断
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文献和实验real time sybergreen concentration-Real-Time PCR
hi evry body! any body known realtime sybergreen concentration in pcr reaction. i planed external addition all sybergreen kit (roche) kontent??? -sef- the only real advice i can give you is to not add sybr green externally
real time PCR primers-Real-Time PCR
is about 20-28bp. i recommend your read the data at good look -littlecell- thanks the website is very useful -generider- 上一篇：real time sybergreen concentration-Real-Time PCR 下一篇
Real Time PCR problem - different dilutions have the sam
? is it possible you have some strong primer-dimer? that would perhaps explain the great amplification in your NTC... -aimikins- 上一篇：dissociation curve of real time pcr products-Real-Time P 下一篇：real time sybergreen concentration-Real-Time PCR
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