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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温
- 供应商:
臻诺生物
- 规格:
200 μl
KGAF022|Ca²⁺ GPCR 分析‑钙离子指示探针 Fluo‑2, AM 凯基 KeyGEN
货号:KGAF022‑1;规格:1 mg;Fluo‑2‑AM(乙酰氧基甲酯)CAS:1070771‑36‑6Cayman Che...;分子量:1061.0Cayman Che...;纯度≥98%(HPLC)品牌:凯基 KeyGEN;仅限科研,严禁临床诊断、人体使用储存:‑20℃、完全避光密封保存;有效期 12 个月;严禁反复冻融;避免光照凯基
参考实验说明:Fluo‑2‑AM 为细胞膜可透性 AM 酯探针;DMSO 溶解配成母液;工作终浓度常用 1‑5 μM;37℃细胞孵育 30‑60 min 加载;胞内酯酶水解 AM 基团,生成 Fluo‑2,结合钙离子后荧光显著增强;Ex:488 nm,Em:515 nm;Kd≈230 nM;适合 GPCR 受体介导钙流检测、活细胞胞内钙离子成像、高通量钙信号筛选。建议配合 Pluronic F‑127 助溶,降低 AM 探针聚集
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文献和实验作用。在哺乳动物的神经系统中,钙离子是一类重要的神经元胞内信号分子,神经元静息状态下,胞内钙离子浓度约为50-100nM,而当神经元活动的时候,胞内钙离子浓度能上升10-100倍,而钙离子对于突触囊泡释放必不可少;神经元在放电的时候会爆发出一个短暂的钙离子浓度高峰,这意味着神经元钙离子浓度表征突触传递和神经元活动。神经元钙离子浓度表征突触传递和神经元活动示意图因而,神经元钙离子成像技术的原理就是借助钙离子浓度与神经元活动之间的严格对应关系,利用特殊的荧光染料或者蛋白质荧光探针(钙离子指示
Fluo-3-Am为一新型的高度特异性Ca2+荧光指示剂,可以灵敏地反映细胞内游离钙离子浓度的变化,Fluo-3-Am进入细胞后经非特异性酯酶脱去Am酯,成为脂溶的Fluo-3留在细胞内,当Fluo-3与细胞内游离钙结合后,其荧光强度是Fluo-3本身的40倍以上,当用480nm波长激发时,其荧光强度与游离钙离子浓度成正比。具体如下:1、钙荧光探针负载;取细胞悬液,加Fluo-3-Am至10μmol/L,置二氧化碳培养箱中孵育1h,其间轻微振荡3次。离心,去掉多余的染料。再用无钙缓冲液反复洗涤
钙离子是机体的重要元素,同时作为细胞内第二信使通过与钙调蛋白(Calmodulin,CaM)结合激活多种蛋白激酶(如腺苷酸环化酶、磷酸二酯酶、钙调蛋白激酶等)及诸多蛋白水解酶和核酸酶,从而参与包括细胞代谢、细胞周期等多种细胞功能的调节,在细胞的许多生命活动中担当着重要的角色。因此,钙离子测定在医学实验研究中有着重要意义。钙离子测定技术得益于两种近代实验技术,一是钙激活蛋白及荧光指示剂(或称荧光探针),二是荧光检测及成像分析,这些技术的日臻成熟使我们能够观察到许多与钙离子浓度变化有密切关系的亚细
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