死细胞核染料-绿菁SYTOX

Annexin V 凋亡试剂盒常见问题

Q：Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么？ A：Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合，将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合，并产生强烈的荧光，正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性，核染料 PI 或 7-AAD

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表面释放出来。ESCRT-III机制是形成这些气泡的必要条件，当MLKL的激活受到限制或被逆转时，它能维持细胞的生存。在坏死细胞死亡的条件下，ESCRT-III控制质膜完整持续的时间。由于ESCRT-III的作用，坏死细胞可以表达趋化因子和其他调节分子，促进CD8+T细胞的抗原交叉刺激。 研究人员通过将Sytox-Green标记的L929细胞死亡刺激物转染到L292细胞中，用Incucyte®监控不同时间点以及不同抑制剂的情况下的细胞死亡情况（% SytoxGreen），并确认ESCRT-III

关于PI（碘化丙啶）的讨论

iodide,PI）检测 早期死亡细胞膜通透性状态的不同是区分细胞凋亡和坏死的一个重要指标，凋亡细胞在进入最终溶解阶段前，胞膜通透性无明显改变，相对分子质量大的与DNA结合的荧光染料（如PI）不能时入凋亡细胞内，而相对分子质量小的荧光染料（如Hoechest 3342或33258等）仍能被细胞摄取。应用流式细胞仪或荧光显微镜可区分和坏死细胞，细胞内DNA出现Hoechest 3342标记而不出现PI标记的为凋亡细胞。偶得细胞是用PI染色的，经过流氏细胞仪检测出现一个亚二倍体峰，是否能和坏死区别？因为偶