KGAF015核—线粒体转位分析试剂盒（HCS法）

凯基 KGAF015 核‑线粒体转位分析试剂盒（HCS 法）

货号：KGAF015，科研专用，不可临床诊断凯基生物

 

高通量高内涵筛选 HCS 专用，活细胞荧光多重标记试剂盒；同时标记线粒体、示踪目标蛋白（Alexa‑488 标记组蛋白 H1），用于检测蛋白在细胞核‑线粒体之间的转位、共定位分析，适配高内涵成像系统、激光共聚焦显微镜。

核心特性

1. MitoRed 线粒体探针：可透活细胞，特异性标记线粒体，固定后荧光信号可保留；Ex/Em：580 nm /610 nm，兼容 TRITC 通道凯基生物。
2. Alexa Fluor488 标记组蛋白 H1：用于示踪目标蛋白，追踪蛋白在细胞核‑线粒体之间移位，Ex/Em：495 nm /519 nm，兼容 FITC 通道凯基生物。
3. 配套细胞核复染试剂，实现线粒体（红）‑目标蛋白（绿）‑细胞核（蓝）三色同时成像；适合高通量 96 孔板贴壁细胞 HCS 筛选，药物诱导蛋白转位、凋亡信号通路研究。

⚠️全程避光操作；MitoRed 为活细胞染料，孵育浓度不宜过高，避免线粒体毒性；仅适用于贴壁细胞，不适合悬浮细胞直接检测凯基生物。

试剂盒组分（KGAF015，100 次，96 孔板）凯基生物

简要操作流程（HCS 高内涵，96 孔贴壁细胞）凯基生物

1. 细胞接种于黑色底透 96 孔板，给药 / 刺激处理，弃培养基，预冷 pH7.6 PBS 洗涤 2 次。
2. MitoRed 用染色缓冲液稀释至终浓度 100‑500 nM，37℃避光孵育 15‑45 min；弃染色液，预热缓冲液洗涤 2‑3 次。
3. 导入 Alexa‑488‑组蛋白 H1 结合物，完成蛋白标记。
4. 加入 Hoechst 核复染液，室温避光孵育 10‑15 min。
5. 洗涤后，直接活细胞成像；或固定后成像；高内涵系统分析共定位系数，判断核‑线粒体蛋白转位。

• MitoRed（线粒体）：红色；Alexa‑488‑H1（目标蛋白）：绿色；Hoechst（细胞核）：蓝色。