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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温
- 供应商:
臻诺生物
- 规格:
50 块胶
KGP113‑red15 红色浓缩胶 SDS‑PAGE 预混胶(15% 分离胶)
仅供科研,不可临床诊断;货号正式命名:KGP113‑15%(red 红色浓缩胶款),可做约50 块 1.0 mm 迷你胶凯基生物
基础参数
- 分离胶浓度:15%,适合小分子蛋白分离,蛋白分离范围约10‑45 kDa
- 特色:红色彩色浓缩胶,制胶后上层胶显红色,孔道边界清晰,灌胶、插梳、拔梳观察更直观,不影响电泳、转膜、考马斯亮蓝 / 银染 / WB 显色结果凯基生物
- 无需自备 TEMED,配套改良促凝剂;仅需补 APS 与水即可配胶
- 产出:约 50 块 1.0 mm 厚度 mini 蛋白胶
- 储存条件:2‑8℃避光保存,禁止冷冻;有效期 6 个月凯基生物
- 适用:SDS‑PAGE 蛋白电泳、WB 前制胶。
试剂盒组分(KGP113‑15% red,50 assays)
| 组分 | 规格 | 储存 |
|---|---|---|
| 15% 分离胶预混液 | 300 mL | 2‑8℃避光 |
| 红色彩色浓缩胶预混液 | 150 mL | 2‑8℃避光 |
| APS 粉末 | 1 g | 2‑8℃ |
| 改良促凝剂 | 700 μL | 2‑8℃避光 |
使用要点
- 红色浓缩胶预混液使用前充分摇匀;
- 临配胶前再加入 APS + 改良促凝剂,混匀后尽快灌胶;
- 凝胶速度受室温影响,温度高可减少促凝剂用量;
- 红色染料仅为示踪染料,电泳过程中会向负极迁移,不干扰后续 WB、染色;
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文献和实验泳吧。4、在我用SDS-PAGE胶进行电泳过程中,一直以来都是按照说明书配制压缩胶和分离胶的,并且在说明书中,以配置2块胶为例,分离胶说明书中是让配置10ml,压缩胶是3ml。我一直以为是对应关系,在这次大悟之后我发现分离和压缩完全不是一对一对应关系,人家只是给了你配置这么多体积胶的配方而已,虽然在一个纵列上,但是绝不是对应关系(我确实才觉悟,高手轻鄙视哈)。5、接上一条经验,所以我在配胶过程中,下层分离胶配制了10ml,但是实际上每块玻板里面只加了大概3.5ml吧,也就是整个玻板高度的60-70%的样子。然后压缩
,以确保胶条插入位置准确。合拢灌胶模具后并直立放置,双手均匀用力向下扣住翼型扳手以关闭灌胶模具。若位置正确,校准卡应该可以正常上下抽拉活动而不被夹在胶条与玻璃板之间。(图3- 5) •用5 ml分离胶溶液(图 6)制备浓度为12%的SDS-PAGE凝胶,然后用移液管将1 ml乙醇滴入装好的灌胶模具中。等候60分钟使凝胶聚合。当把溶液倒入玻璃板夹层之间时,将移液管嘴直接置于玻璃板之间,缓慢地滴出液体,尽量避免形成气泡。凝胶完成聚合后,移除乙醇,将制备好的浓缩胶溶液倒入到分离胶上。轻轻将0.75 mm
℃。 实验步骤 凝胶配制 1) 根据目的蛋白分子量按比例配制分离胶,缓慢摇动混匀,避免由于剧烈混匀混入氧气。待凝胶溶液混合均匀后,将混匀的凝胶溶液缓慢注入两层玻璃板中,再在液面上小心注入一层无水乙醇,以阻止氧气接触凝胶溶液影响凝胶的聚合,保持水平,在 37 ℃ 恒温箱中静置约 1 小时,直至凝胶溶液完全聚合凝固。 2) 按比例配制浓缩胶,缓慢摇动混匀,倒掉分离胶上层无水乙醇并用滤纸吸去已凝固分离胶上的无水乙醇,平缓注入浓缩胶溶液,小心插入梳子,避免齿尖产生气泡。在 37 ℃ 恒温箱中
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