KGA360成神经细胞鉴定NF/NSE免疫组化试剂盒（IHC

科研用途，不可用于临床诊断

 

规格：50 tests

✅ 产品简介

• 检测样本：人、大鼠、小鼠样本；石蜡切片 (FFPE)、冰冻切片、细胞涂片 / 爬片均可
• 原理：无生物素体系，HRP 聚合物直接连接二抗，信号放大，规避组织内源性生物素背景干扰；DAB 显色（棕黄色阳性）
• 优势：孵育步骤少，聚合物二抗仅需 10 min；增强型 DAB，显色稳定、对比度好

🧬 靶标说明

1. NF（神经丝蛋白 Neurofilament）：神经元骨架蛋白，标记神经元胞体、轴突，提示神经细胞骨架成熟
2. NSE（神经元特异性烯醇化酶）：神经元胞质标志物，表达于神经元、神经内分泌细胞；胞质弥漫棕染

组合意义：NF+NSE 双阳性 → 判定成神经细胞 / 神经元，常用于干细胞向神经方向诱导分化鉴定、神经母细胞相关组织染色

📦 试剂盒组分（标准套装）

1. NF 一抗、NSE 一抗
2. 3% H₂O₂（内源性过氧化物酶阻断液）
3. 封闭液
4. HRP 聚合物二抗（一步法）
5. 增强型 DAB 显色液（DAB 底物 + 稀释液）
6. PBS 洗涤缓冲液
7. 复染试剂（苏木素）
8. 阴性对照 / 阳性对照片（部分批次）

📝 简要 IHC 操作流程（石蜡切片）

1. 脱蜡水化：二甲苯→梯度乙醇→PBS 漂洗
2. 抗原修复：柠檬酸缓冲液 pH6.0 高温修复（95~98℃，20 min），自然冷却
3. 灭活内源酶：3% H₂O₂室温 10 min；PBS 洗 3×5 min
4. 封闭：封闭液室温 30 min，甩掉不洗
5. 滴加一抗（NF 或 NSE，分片染色），4℃孵育过夜；PBS 洗涤
6. HRP 聚合物二抗，室温 10 min；PBS 洗涤
7. DAB 现配，显微镜下控时显色，自来水终止
8. 苏木素复染、脱水透明、封片
9. 镜检：胞质棕黄色为阳性

冰冻切片 / 细胞爬片可省略脱蜡，抗原修复可酌情缩短或不用。

⚠️ 关键注意事项

1. DAB 有潜在致癌性，全程戴手套，废液单独收集处理
2. DAB 必须现配现用，避光，配制后半小时内用完
3. 建议分开切片单独染 NF、NSE（试剂盒为单指标显色，不是双染），分别观察两个标记
4. NSE 存在一定非特异性表达（平滑肌、肾小管等），必须联合 NF 结果共同判读，不能单凭 NSE 判定神经元
5. 储存：一抗建议 4℃避光，避免反复冻融；其余组分常温 / 4℃，详见说明书
6. 仅科研使用，不能用于临床病理诊断

📌 适用场景

• BMSCs / 干细胞诱导成神经分化鉴定
• 神经组织、神经球、成神经细胞体外培养鉴定
• 神经母细胞相关动物模型组织 IHC 染色