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低温
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臻诺生物
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50 ml
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文献和实验染色液,染色5分钟。也宜用摇床,或手动晃动。 D. 用PBS或0.9%NaCl洗两遍,每次3分钟。 E. 将切片置于载玻片上,滴一滴抗淬灭封片液,盖上一洁净的盖玻片,尽量避免气泡。 F. 荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。激发波长在350nm左右,发射波长在460nm左右, Hoechst 33258的吸收光谱和发射光谱,左侧峰为吸收光谱,右侧峰为发射光谱。 DAPI染核 原理: 主要结合dsDNA;结合小沟的AT。DAPI也结合RNA,但其发射峰波长(500nm
在无血清细胞培养条件下将人 iPS 细胞体外分化为结肠类器官
类器官的孔中移除Blocking Buffer。避免P-200移液管头吸入类器官。 通过添加5 µg/mL DAPI (D9542) 在1X PBS(每份样品300-500 µL)中准备核染色。 为每个样品添加DAPI染色液,在室温下孵育15-20分钟。 用1X PBS (D8537)清洗3次,每次10-15分钟。 样品已准备好在共聚焦显微镜上成像。 材料 References 1.Sato T, Stange DE, Ferrante M, Vries RG, van Es JH
、盖玻片、细胞培养瓶、生理盐水、电泳仪、高速离心机、紫外检测信、超净工作台、二氧化碳培养箱、恒温水浴锅、细胞记数器、DMEM培养基(GIBOCO公司)、溴酚蓝指示液、台盼蓝染色液(20.0g/L生理盐水配制)、DAPI染料、(4,6-diamidino-2-phenylindole)(Sigma公司)、TUNEL检测试剂盒(Boehringer Mannheim公司)青霉素、链霉素、Rnase A、硫酸亚铁(FeSO4)、双氧水(H2O2)、50xTAE缓冲液、PBS缓冲液、裂解液等。 4. 实验
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