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低温
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臻诺生物
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10 ml
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Hoechst 33258染色液,染色5分钟。也宜用摇床,或手动晃动数次。 5. 用PBS或0.9%NaCl洗两遍,每次3分钟。 6. 滴一滴抗荧光淬灭封片液于载玻片上,盖上贴有细胞的盖玻片,尽量避免气泡。使细胞接触封片液,切勿弄反。 7. 荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。 二、悬浮细胞 1. 离心收集细胞样品于1.5 ml离心管内,加入0.5 ml固定液,缓缓悬起细胞,固定10分钟或更长时间(可4℃过夜)。 2. 离心去固定液,用PBS或0.9%NaCl洗两遍,每次
%乙醇中浸泡5分钟或更长时间,无菌超净台内吹干或用细胞培养PBS或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍,再用细胞培养液洗涤一遍。将盖玻片置于六孔板内,种入细胞培养过夜,使约为50%-80%满。B. 刺激细胞发生凋亡后,吸尽培养液,加入0.5ml固定液,固定10分钟或更长时间(可4℃过夜)。C. 去固定液,用PBS或0.9%NaCl洗两遍,每次3分钟,吸尽液体。洗涤时宜用摇床,或手动晃动数次。D. 加入0.5ml Hoechst 33258染色液,染色5分钟。也宜用摇床,或手动晃动数次。E. 用PBS
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