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- 凯基
- 江苏
- KGF016
- 2026年10月13日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温
- 供应商：
臻诺生物
- 规格：
10 μl
KGF016‑HRP Streptavidin‑HRP 辣根过氧化物酶标记链霉亲和素（凯基 KeyGen）
科研专用，不可临床诊断
基础信息
- 货号：KGF016‑HRP（KGF016 系列酶标记，同系列 KGF016‑1 FITC、KGF016‑PE、KGF016‑Cy3）
- 全称：HRP‑Streptavidin，辣根过氧化物酶标记链霉亲和素
- 规格：100 μg，冻干粉末
- 来源：Streptomyces avidinii，无糖基四聚体链霉亲和素，非特异结合低
- 标记酶：HRP（辣根过氧化物酶），HRP / 蛋白摩尔比约 2‑4
- 生物素结合活性：1 mg 蛋白结合≥4 μg 生物素
储存与复溶
- 储存条件：‑20℃避光密封，冻干状态有效期 12 个月
- 复溶：无菌 PBS (pH7.2‑7.4) 配成1 mg/mL 母液；分装避光‑20℃，严禁反复冻融
- 工作液现配现用，避免室温长时间放置；含防腐剂 会抑制 HRP 活性，不要加入工作体系。
-
主要应用
- 免疫组化 IHC‑P、免疫细胞化学 ICC：生物素‑链霉亲和素放大显色，DAB/AEC 显色
- Western Blot、ELISA，生物素化抗体信号放大
- 斑点印迹、生物素探针检测
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文献和实验抗体结合，后者再与生物素标记的第二抗体结合，然后加入ABC复合物，结合到第二抗体的生物素上，最终形成的复合物网络了大量的酶分子。因此，敏感性更高。目前常用的亲和素从链霉菌(streptomyces)培养物中提取，因此称为链霉亲和素―生物素―过氧化物酶复合物技术(streptavidin biotin-peroxidase complex method，SABC法)。2．免疫组织化学酶类标记物 作为免疫酶组织化学标记物的酶以共价键的形式结合在抗体上，制成酶标抗体(SABC法是链霉亲和素―生物素与酶结合)，再借助酶
放置。 （2）用洗涤缓冲液润洗膜。 （3）加入15ml封闭缓冲液，室温振荡30min。 （4）用1ml封闭缓冲液稀释15μl辣根过氧化物酶标记链霉亲和素（Streptavidin-HRP conjugate），加入显色盒中（不要将酶稀释液直接加在膜上），室温继续振荡45min。 （5）倒掉封闭缓冲液，用洗涤缓冲液洗涤三次，每次室温振荡10min。 （6）等体积的混合Substrate A和B。 （7）将膜放在一个平板上，用1ml底物溶液覆盖整张膜。（为了确保底物溶液在整张膜上分布均匀，可以再滴加了底物
双链进行变性聚丙酰胺凝胶电泳，用放射自显影或磷屏成像系统检测被保护的探针的信号; 对于生物素标记的探针，杂交双链经过变性聚丙酰胺凝胶电泳后电转移至尼龙膜，采用链霉亲和素－辣根过氧化物酶（Streptavidin-HRP）和化学发光底物与膜上biotin标记的探针结合，X射线胶片或化学发光图像分析仪检测杂交信号。
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