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10
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臻诺生物
- 保存条件:
低温
凯基 高敏CCK-8细胞增殖检测试剂盒 KGA317s-3000
凯基 高敏CCK-8细胞增殖检测试剂盒
✅检测原理
✨高敏版优势:灵敏度高于普通 CCK-8,低细胞数量样本信号更稳定;对细胞毒性低,可长时间孵育;无需提前预混试剂,直接加液,操作简单,无放射性凯基生物
📦试剂盒组分(3000T)
- CCK-8 高敏检测液:30 mL(单瓶,即用型)
🧊储存条件
🧪简要实验步骤(96 孔板)
- 按实验方案接种细胞,给药处理,设置空白孔(仅培养基)、对照组
- 每孔直接加入 10 μL CCK-8 检测液(培养基体积 100 μL 体系),轻柔混匀,避免气泡
- 细胞培养箱避光孵育,常规 1–4 h;高敏体系可根据信号强弱调整孵育时长
- 酶标仪450 nm测吸光度,参考 600–650 nm 做参比扣除背景
计算公式:细胞活力 % =(给药组 OD−空白 OD)/(对照组 OD−空白 OD)×100%
⚠️关键注意事项
- 孔内不要产生气泡,气泡会干扰酶标读数;
- 酚红培养基不影响检测,但高浓度还原剂、部分药物会干扰显色;
- 孵育时间需要预实验摸索,避免信号过饱和;
- 试剂避光操作,开盖后尽量减少反复冻融(4℃避光,不要冻存);
- 适合贴壁 / 悬浮细胞,MTT 替代方案,无需后续溶解甲臜。
同系列规格对照
- KGA317s-500:500T(5 mL)
- KGA317s-1000:1000T(10 mL)
- KGA317s-3000:3000T(30 mL)
一、试剂盒说明 凯基高敏 CCK-8 细胞增殖检测试剂盒是用于测定细胞增殖或毒性试验中活细胞数目的一种高灵敏度, 无放射性的比色检测法。实验的灵敏度优于普通 CCK-8 法,对于单样本少量细胞的检测灵敏度更高。由于 本产品相当稳定,并且对细胞没有毒性,可直接加入到细胞样品中长时间孵育。
二、凯基 高敏CCK-8细胞增殖检测试剂盒 组 份 Cat: KGA317s-500 500 assays Cat: KGA317s-1000 1000 assays 储存条件 CCK-8 检测液 5 mL 10 mL 4℃避光,一年有效
三、试剂盒以外自备仪器和试剂 低速离心机 、酶标仪(450nm 波长)、平板摇床、微量移液器、96 孔板
四、注意事项 1. 本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应,如果待检测体系中存在较多的还原剂,例如一些抗氧化剂会 干扰检测,需设法去除。 2. 如果待测溶液有还原性,测定不含细胞,但含有新型细胞增殖及毒性检测溶液在 450 nm 处的空白吸光 度。如果该吸光度很小,则可以直接加入高敏 CCK-8 检测溶液,如果吸光度相对较大,则需要除去培 养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl CCK-8 溶液进行检测。 3. 用酶标仪检测前请确保孔内没有气泡,否则会干扰测定。 4. 为保证您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
五、操作方法 1. 96 孔板加入细胞 100μL/孔(约 1×10 4),置 37℃ 5%CO2细胞培养箱培养 24 小时。 2.加入适当浓度的受试化合物。 3.将 96 孔板在 37℃,含 5% CO2空气及 100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。 4. 向各孔中加入 10 μl 的新型细胞增殖及毒性检测溶液。 5. 37℃下孵育 1~4 小时。 6. 酶标仪在 450nm 波长处检测每孔的光密度。 7.结果分析 (1) 细胞的存活率:将各测试孔的 OD 值减去本底 OD 值(完全培养基加 CCK-8 检测液,无细胞) 或空白药物孔 OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加 CCK-8 溶液,无细胞),各重复 孔的 OD 值取均数±SD。 细胞的存活率以 T/C%表示,T 为加药细胞的 OD 值,C 为对照细胞的 OD 值。 细胞存活率% =(加药细胞 OD/对照细胞 OD)×100 (2) 求出 T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及 T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。
凯基 高敏CCK-8细胞增殖检测试剂盒 KGA317s-3000
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文献和实验细胞增殖实验看起来方法很多,但不同检测实际上观察的是不同层面的变化。CCK-8和ATP生物发光主要反映活细胞的代谢状态,EdU直接标记DNA合成,克隆形成观察长期持续增殖能力,Ki-67可定位组织或细胞中的增殖群体,流式细胞周期则显示细胞在G0/G1、S和G2/M期的分布。 本文围绕这6种常用方法,整理各自的检测原理、典型操作、适用场景及优缺点,重点区分不同结果究竟代表什么。 一、六种方法分别测到了什么? 二、CCK-8:最常用的细胞
荧光结果显示沉默 EGFL7 的细胞系中 EGFL7 蛋白信号较弱。CCK-8 检测显示 U87-EGFL7kd 和 U251-EGFL7kd 显著抑制细胞增殖。 动物水平上:裸鼠分别注射 U87-MG 细胞、U87-EGFL7kd 细胞、U87-MG 细胞+司美替尼治疗。EGFL7 敲除组与司美替尼治疗组的颅内信号强度在肿瘤细胞注射后第 14 天显示出肿瘤体积的差异。小鼠生存分析和免疫组化染色表明,司美替尼有效抑制 U87 胶质瘤的生长小鼠颅内肿瘤标本中 ERK 和 PKM2 表达均与 EGFL7 表达呈
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