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重组 Enhanced GFP蛋白(His tag)
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重组 Enhanced GFP蛋白(His tag)
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50ug
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文献和实验Strep-tag®技术是亲和纯化重组蛋白的常用工具,它基于自然界中最强的非共价相互作用之一,即生物素与链霉亲和素的相互作用。该纯化系统的突出特点是纯化过程温和、目的蛋白纯度高、特异性强、兼容多种表达系统,对于有挑战性蛋白的纯化十分有帮助,因此近些年来脱颖而出。 本文将从以下方面介绍Strep-tag®技术: 标签介绍 纯化原理 标签-配体 纯化步骤 系统特点 标签介绍 目前有2种广泛使用的Strep标签: 它们分别是: Strep-tag®II 8 aa小标签(Trp-Ser
质,小分子或是金属。当融合有亲和标签的蛋白通过标签-配体作用结合再层析基质上时,通过洗杂步骤,即可去除掉其他的细胞成分。 为了洗脱所需要的蛋白质,通过改变缓冲液的条件,如pH,或通过竞争亲和标签和配体连接的方法来进行。 但怎样的纯化是较为成功的呢?仅达到所需的质量量级,如毫克级(或克级)即可满足吗? 这些并不简单。质在蛋白纯化中同样尤为重要,比如,就蛋白的生物活性和纯度而言,通常会有所要求。 以下我们来讨论并且比较2种技术: His-tag系统和Strep-tag®系统,都使用了亲和层析法来纯化
naj2007 请教一下各位老师,在构建过表达载体的时候,VEGF和GFP是不是不可以做成融合蛋白,但是如果用不同的启动子的话,很容易丢失荧光,有没有什么解决方法。 zhujoker 可以做成融合蛋白的,即使是使用不同的启动子的话荧光也不那么容易丢失的,大不了你将荧光的启动子换成强的如CMV,EF1a之类。 kinguangjun 或者你可以用CMV-VEGF-IRES-GFP来做
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