- ￥600 - 2000
- ATCC
- XY-XB-2167
- 中国/美国
- 2025年08月10日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 细胞类型：
科研
- 品系：
详情请咨询我司客服
- 组织来源：
详情请咨询我司客服
- 物种来源：
鼠/人/其它
- 细胞形态：
上皮样/成纤维样/其它
- 器官来源：
详情请咨询我司客服
- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 年限：
详情请咨询我司客服
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 英文名：
HPAEC
【产品介绍】
人肺动脉内皮细胞_HPAEC细胞培养基本方法
（一）准备和安装过滤器
清洗好过滤器，干燥，放入一张孔径0.22μm的微孔滤膜，用布包装好，15磅20 min进行高压灭菌处理。 在超净台内打开过滤器架好，胶管一端接入滤泵再插入待除菌的液体中，出口端胶管深入到已消毒好的瓶子中。用泵过滤，过滤后要检查滤膜是否完好无损。
(二)小牛血清的处理
市场上出售的小牛血清一般做了灭菌处理，但在使用前还应做热灭活处理，即通过加热的方法破坏补体(近来也有观点认为热灭活处理是不必要的)。胎牛血清不必灭活。
1、 将血清加热至56℃并保持30 min，其间要不时轻轻晃动，使受热均匀，防止沉淀析出。
2、 处理后的血清贮存于4℃。
3、 小牛血清在使用前最好进行筛选以掌握血清的质量。
(三)生长培养基的配制
除无血清培养之外，各种合成培养基在使用前需加入一定量的小牛血清或胎牛血清和抗菌素。
培养基分装成小瓶(100～200 mL)以便使用，翻帽塞塞紧瓶口。
按如下比例配制： 基本培养基占80％~90％，小牛血清或胎牛血清占10％~20％。 按1％体积分数加入双抗贮存液(青霉素+链霉素)，使青霉素和链霉素的终浓度分别为100 U／mL和100 μ／mL，。
(四)冻存细胞的复苏
应遵守慢冻快融的原则。先将水浴锅调至37-37。5度，取出冻存的细胞迅速放入后将细胞面浸至水面以下不断摇动至融化。
在无菌台内将完全培养基加入50ml的小培养瓶内，约5ml左右，然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞，置培养并内轻轻摇晃，使细胞均匀后置培养箱内培养。
(五)传代:
贴壁细胞:
对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml完全培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入完全培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞:
一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入完全培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入完全培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养。
(六)冻存
将贴壁细胞消化后离心收集，悬浮细胞直接离心收集，以完全培养基或胎牛血清重悬细胞至终浓度约106/ml。加入10%的DMSO。以每管1～2ml分装至冻存管中。用绝热材料包裹置-70摄氏度冰箱冷冻过夜。次日保存到液氮中。
产品图片：
(七)注意事项
1.玻璃吸管和玻璃培养瓶的消毒:1)高压蒸汽灭菌15分钟以上;2)干烤消毒140度2小时以上;
2.无菌工作台先清洗后用75%酒精擦拭干净，紫外线照射40分钟以上;各种培养板照射3小时以上;
3.培养基(pH7.2)和血清配制好后要做无菌试验:将血清按10%加入培养基内，用无菌的玻璃离心管或玻璃瓶取完全培养基5-10ml置培养箱内培养2-3天，肉眼见无浑浊或沉淀等异物。分装后置4度保存;
4.消化液(pH7.8)或其它加入液，应用高压蒸汽灭菌或一次性无菌滤器过滤除菌，分装成支置-20度保存;
5.培养箱应先用清水清洗后用75%酒精擦拭一遍(如有紫外线的应照射1小时以上，如有高温灭菌的应按程序来菌)。至少每月一次。
6.进入操作时应注意先清洗双手及手腕，然后用75%酒精擦拭，操作时注意无菌台内空间层次。手及物品不要在暴露的瓶口上方来往，如果数量较多，培养瓶应放在与酒精灯平行地方便于操作，瓶与瓶之间应相隔一定的距离，开瓶(盖)时应先用75%酒精反复擦拭或用灯烧，打开后应用灯先烧口，然后烧盖。用完后同样操作。整个操作过程尽量在无菌台靠里面一点。
烜雅生物发布：我公司产品质量可靠，售后有保障
细胞7日内有问题免费退换。欢迎前来咨询采购
人肺动脉内皮细胞_HPAEC相关产品：
| 人宫颈癌细胞(HPV-18 永生化细胞) | HeLa229 |
| 人宫颈癌细胞 | Hela P10s-11F |
| 人宫颈癌细胞 | HeLa-S3 |
| 人宫颈癌细胞 | SiHa |
| 宫颈癌细胞 | HCE1 |
| 人宫颈癌细胞 | CaSKi |
| 人子宫内膜癌细胞 | RL95-2 |
| 人子宫鳞癌细胞（高分化） | HCC 94 |
| 人子宫颈癌细胞 | C-33A |
| 人前列腺癌细胞 | PC-3 |
| 人前列腺癌细胞 | PC-3M |
| 人前列腺癌细胞高转移亚系 | PC-3M 1E8 |
| 人前列腺癌细胞高转移亚系 | PC-3M 2B4 |
| 人前列腺癌细胞 | DU-145 |
| 人前列腺癌细胞 | UI-1 |
| 人前列腺癌细胞 | 22RV1 |
| 前列腺癌细胞 | LncaP |
| 非雄激素依赖型前列腺癌 | Tsu-Prl |
| 人胎盘绒毛癌细胞 | JAR |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验4个样本——scRNA-seq——常规单细胞测序生信分析 。 总结 4个样本——scRNA-seq——常规单细胞测序生信分析——简单免疫组化验证。 研究目的：利用单细胞RNA测序（scRNA- seq）构建一个细胞图谱，全面描述慢性血栓栓塞性肺动脉高压（CTEPH）患者的肺动脉内膜切除组织的细胞组合特征； 样本信息：5个肺动脉内膜切除的组织； 测序策略：10x平台，单细胞测序（scRNA-seq） 捕获细胞数：27,140细胞； 结论：发现了17个细胞簇的特征，对应10,518
的横向分辨率达90纳米，是目前国际上同类技术的最好水平。 此次研究组与第四军医大学和德国康斯坦茨大学合作，利用该系统成功获得了牛肺动脉内皮细胞线粒体和小鼠脑神经元细胞的超分辨图像，并且实现了小鼠脑神经元细胞和植物花粉的三维光切片成像，其成像深度和成像速度比当前同类切片显微技术均提高了约10倍。 原文链接：DMD-based LED-illumination Super-resolution and optical sectioning microscopy
就如上新手进阶要点总结之后，笔者总结了一下免疫荧光需要特别关注的细节，以期作出更完美的图片效果。1、了解及预测蛋白的定位例如：下图使用肺动脉内皮细胞（ BPAE）观察线粒体的显色，采用 405nm，488nm，561nm 的激光，100x NA 1.49 的物镜对细胞内线粒体的分布进行简单的观察，此图可见，单纯的 mito-tracker 并不能清晰看见线粒体内部的结构和蛋白相关关系，因此，明确蛋白定位，根据所需分辨率选择显微镜、相应的荧光蛋白和探针非常重要。比如研究者应大致预测观察目标是存在
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
