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- 构建稳定细胞株分为两大类：一类是构建稳定表达外源基因（永久表达）的细胞株；另一类是稳定敲除/敲降基因的细胞株；稳定表达外源基因细胞株通过过表达慢病毒系统感染并经过药物/流式筛选而获得长期稳定传代的细胞株；稳定敲降基因细胞株通过siRNA慢病毒系统感染并经过药物/流式筛选而获得长期稳定传代的细胞株；稳定敲除基因的细胞株则是通过Cas9/CRISPR系统慢病毒系统感染，并经过流式筛选而获得长期稳定传代的细胞株；
- 上海
- 2026年02月02日
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- 提供商：
上海典西生物科技有限公司
- 服务名称：
构建过表达/敲除/敲降稳转细胞株服务
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服务介绍
构建稳定细胞株分为两大类：一类是构建稳定表达外源基因（永久表达）的细胞株；另一类是稳定敲除/敲降基因的细胞株；稳定表达外源基因细胞株通过过表达慢病毒系统感染并经过药物/流式筛选而获得长期稳定传代的细胞株；稳定敲降基因细胞株通过siRNA慢病毒系统感染并经过药物/流式筛选而获得长期稳定传代的细胞株；稳定敲除基因的细胞株则是通过Cas9/CRISPR系统慢病毒系统感染，并经过流式筛选而获得长期稳定传代的细胞株；
公司优势
1. 技术技巧长期积累，技术经验丰富，获得的稳转细胞株同时在mRNA水平和蛋白水平双重验证；
2. 具有独特的感染系统和筛选体系，特别是通过Cas9/CRISPR慢病毒系统建立贴壁细胞及悬浮细胞比如Jurkat，NALM6，RS4:11等的敲除稳转细胞株具有自己特异，高效的效率。
客户提供
1. 确定构建过表达/敲降/敲除稳转细胞株类型；
2. 确定基因的名称及Gene ID；
3. 确定细胞类型：悬浮细胞/贴壁细胞等（提供生长状态好，生长代数低的细胞）；
4. 提供Western blot检测的抗体；
最后交付
完整的实验报告包括实验步骤，试剂耗材，厂家货号，实验结果及实验图片等
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文献和实验Nature 深度剖析：管坤良与 Alj 组研究成果为何截然相反，Hippo 通路调控乳腺癌的两面性
ERα，在癌细胞系 T47D 中敲降 LATS1 不影响 ESR1 mRNA 水平（Extended Fig 8b）。考虑到方法的不同，作者采用了上文作者使用的 shRNA 敲降 LATS1/2，但发现敲降 LATS1/2 既不影响 ERα 水平，也不活化 YAP/TAZ。作者猜测，可能是残余的 LATS1/2 的量仍足以抑制 YAP/TAZ 活化。此外，在其它 ER + 乳腺癌细胞系，及小鼠的输卵管、乳腺和子宫内膜类器官（organoids）模型中，敲除 LATS1/2 均可抑制 ESR
目前慢病毒载体主要应用在以下几个方面： 细胞基因治疗（截止目前，已上市的 CAR-T 产品有 9 款采用了慢病毒载体递送 CAR 基因） 基因表达调控（过表达、RNA 干扰研究等） 基因编辑（CRlSPR/Cas9 gRNA 文库筛选、基因敲除、敲入、点突变、基因激活/抑制） 稳转细胞株构建 活体细胞成像追踪 转基因动物 图 1 慢病毒载体的主要应用方向 应用案例 案例 1：用慢病毒载体进行基因过表达，构建稳转细胞株，研究葡萄糖激酶在前列腺癌（PCa）中的作用[1] 细胞
拯救皱纹 + 脱发！张亮 / 李青峰 / 刘蔡钺团队解码抵抗
在这种过早的皮肤老化过程中也高度上调。图片来源：Nature Aging随后，为了探讨 miR-31 在人类皮肤衰老中的作用。他们收集了整形手术中被丢弃的皮肤样本，并对这些样本进行 miR-31 原位分析。结果同样发现老年人头皮中出现显著的 miR-31 上调。综上，研究人员确认了 miR-31 表达上调与表皮和毛囊的自然衰老以及肿瘤放疗导致的皮肤早衰均密切相关。图片来源：Nature Aging然后，通过构建多个 miR-31 的转基因和条件性敲除小鼠模型，研究者发现它在皮肤上皮组织中的过表达
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