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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 库存:
52
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
详见说明书
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 英文名:
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS5A
- 规格:
株
细胞名称 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS5A品牌
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 CHO-HCV-NS5A细胞整合有丙型肝炎病毒的NS5A基因,能稳定表达NS5A蛋白,是HCV基础研究的极好摸型。它由武汉大学病毒学国家重点实验室郭佳博士于2008年构建并保存。
培养条件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
传代方法 1:
3传代,2-3天传一代
传代情况 C19
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS5A品牌实验要点及说明
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS5A品牌冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
SH3TC2 脱髓鞘相关蛋白SH3TC2N抗体 0.2ml
C19orf46 19号染色体开放阅读框46抗体 0.2ml
SIRT7 沉默调节样蛋白SirT7抗体 0.2ml
RASSF7 RAS家族关联结构域蛋白7抗体 0.2ml
xCT/CCBR1 钙离子通道阻端耐药蛋白CCBR1抗体 0.2ml
Mouse Anti-Rabbit IgM/PE-CY5 PE-CY5标记的小鼠抗兔IgM 0.1ml
Rabbit Anti-dog IgG/Cy5 Cy5标记的兔抗狗IgG 0.1ml
VDAC3 线粒体外膜孔蛋白3抗体(电压依赖阴离子通道蛋白3) 0.2ml
Aconitase 1/IRP-1 铁调节蛋白1抗体 0.2ml
CREG1 E1A激活基因刺激蛋白1抗体 0.2ml
HLA DM 组织相容性复合体α抗体 0.2ml
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS5A品牌L-(+)-Ergothioneine (5 mg)αS-carboxy-2,3-dihydro-N,N,N-trimethyl-2-thioxo-inner salt-1H-imidazole-4-ethanaminium; 2-Mercaotohistidine betaine|NSC 7175; L-(+)-Ergothioneine
C-8 Ceramide-1-phosphate (10 mg)N-octanoylsphingosine-1-phosphate; C-8 Ceramide-1-phosphate
8,9-EE-14(Z)-E (500 ug)(Z)-7-(3-(undec-5-enyl)oxiran-2-yl)heptanoic acid; 8,9-Epoxyeicosa-14(Z)-enoic Acid; 8,9-EE-14(Z)-E
Prostaglandin F3α (500 ug)9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E,17Z-trien-1-oic acid; PGF3α; Prostaglandin F3α
Milrinone (10 mg)1,6-dihydro-2-methyl-6-oxo-[3,4’-bipyridine]-5-carbonitrile; Primacor |WIN 47,203; Milrinone
CV 104; Covitol 1210; NSC 173849; d-α-Tocopherol Acid Succinate; α-Vitamin E Succinate; Vitamin E d-α-Tocosuccinateα-Tocopheryl succinate
NQDI-1 (10 mg)2,
Benztropine (mesylate) (25 g)Cogentin|NSC 169913; (3-endo)-3-(diphenylmethoxy)-8-methyl-8-azabicyclo[3.2.1]octane, monomethanesulfonate
MDMB-CHMINACA (10 mg)(S)-MDMB-CHMINACA; N-[[1-(cyclohexylmethyl)-1H-indazol-3-yl]carbonyl]-3-methyl-L-valine, methyl ester
Glucoraphanin (potassium salt) (1 mg)((E)-5-(methylsulfinyl)-1-(((2S)-3R,4S,5S-trihydroxy-6R-(hydroxymethyl)tetrahydro-2H-pyran-2-yl)thio)pentylidene)amino sulfate, monopotassium salt; Glucoraphanin (potassium salt)
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS5A品牌培养操作步骤
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
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文献和实验为非溶性蛋白,也可被单克隆抗体柱层析,重新还原的产物可以被抗Derpl血清识别,其结合率优于pGEX克隆产物。为了减少繁琐,表达更好的重组蛋白,有人尝试以Der p1的原酶和酶原放人同一酵母载体表达,效果良好。 3.哺乳动物表达 构建一个扩大的载体PEE6.HCMV.GS,从中国仓鼠卵巢细胞(CHO)表达Derpl和Derp2。人巨细胞病毒(CMV)启动子(ACMD)和谷胱甘肽合成酶基因,通过放大质粒拷贝数增加细胞内酶高效表达,以控制抗代谢产物硫代
分子生物学、分子免疫学等学科的发展使基因工程疫苗具有越来越重要的地位。在基因工程疫苗研究的动物细胞表达系统中,最具代表性的就是中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary,CHO)。它是用来表达外源蛋白最多也最成功的一类细胞。本文就CHO细胞表达系统在疫苗研制中的应用做一综述。1、CHO细胞表达体系及其特点 CHO细胞属于成纤维细胞,既可以贴壁生长。也可以悬浮生长。目前常用的CHO细胞包括原始CHO和二氢叶酸还原酶双倍体基因缺失型(DHFR-)突变株CHO。近年来,为降低
。 ⑸UltraCHOTM培养基 UltraCHOTM培养基最适于培养转染和未转染的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞,表达重姐蛋白质。UltraCHOTM培养基以一种改良的DMEM培养基(F-12)为基础,在此基础上添加胰岛素,转铁蛋白以及专利性的纯化蛋白等成分而成。有UltraCHO液体培养基(1X)和干粉培养基(含冷冻添加剂)两种类型的产品可供选择,培养基蛋白含量低于300ug/ml. 应用:培养CHO细胞; 重组蛋白的合成。 ⑹ProCHOTMCDM系统 ProCHO限定培养
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