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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
270
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温
- 规格:
100ml
特别提示:包括茜素红S染色液(2%,pH4.2)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:茜素红S染色液(2%,pH4.2)
产品货号:GL2264
产品规格:100ml
用途:
用于少量钙盐组织的染色和成骨细胞的钙盐染色。
注意事项:
茜素红S往往对少量的沉积物染色可得到更可靠的结果。
储存条件:室温,避光,6个月
除了茜素红S染色液(2%,pH4.2),,我公司还供应以下相关产品:
名称:活细胞核染料(红)
货号:KFS100
规格:500μL
新型活细胞核酸染料( Ex/Em:647/660 nm, bound to DNA)是一种具有细胞膜透性的核酸染料,其在于核酸结合之后荧光强度会得到显著增强。Nuclear View Red 活细胞核酸染料可以用于染死的或者活的真核细胞的RNA 和DNA,在革兰氏细菌中同样也适用。新型活细胞核酸染料具有如下重要特性:
•细胞膜透性,可以穿过几乎所有的细胞膜,包括哺乳动物细胞和细菌。
•极低的荧光背景,未与核酸结合时,染料的量子产率通常<0.01。
•与核酸结合之后,量子产率通常> 0.4。
活细胞核酸染料可以在不同的实验应用中染活细胞或者固定细胞的核酸,能够与配备了常规激光激发器或宽带照明光源的各种荧光检测设备匹配。
最佳的染色探针浓度取决于不同的应用程序类型,此处建议的初始条件是基于验证的特定细胞类型,具体实验中应摸索加以调整。
储存:-20℃,有效期六个月。
名称:线粒体染色试剂盒
货号:HR8609
规格:1000T
名称:细胞膜染色试剂DiO
货号:HR8623
规格:500μl
DIOC16(3)PERCHLORATE 细胞膜染色试剂为绿色荧光标记的细胞膜探针,具有488 / 500nm的最大激发/发射波长。
当亲脂性的绿色荧光探针DIOC16(3)PERCHLORATE 进入细胞膜后,在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。染色液DIOC16(3)PERCHLORATE在进入细胞膜之前荧光非常弱,当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,被激发后可以发出绿色的荧光,具有很高的淬灭常数和激发态寿命。
荧光探针DIOC16(3)PERCHLORATE 通常不会明显影响细胞的活力,因此被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂。除了最简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
细胞膜探针具有多种颜色可以选择,可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的绿色荧光探针,我公司还可以提供红色、橙色、深红色等颜色的染色试剂盒。
以96孔板每孔200μl染色液计,本试剂盒小包装可以染色1000-5000个样本。
储存条件:染料-20℃避光保存;避免反复冻融。
有效期:六个月。
※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制:本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
产品更新:我公司会更新或升级产品,以优化和增强其使用性能,产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时,请参照随产品附带的说明书,不要参照网上下载的说明书,可能是不同的版本。需要最新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全:使用时需要合适的实验室外套,一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛,应立即用水冲洗。
注意事项:
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
检测方法:
流式细胞仪
荧光显微镜
激光共聚焦
样本类型:
● 悬浮细胞
● 贴壁细胞
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材:
仪器
●离心机 ●荧光显微镜/流式细胞仪 ● 移液器 ●冰箱 ●冰盒
耗材
●离心管 ● 吸头
试剂
● PBS(pH7.4,实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液)或者HBSS
使用方法:
使用注意事项:
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
● DIOC16(3)PERCHLORATE染色液为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
● 使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
● 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
●标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化,确定最佳条件。以下方法仅供参考。
●染色后立即进行分析。
●本染色液可用于细胞涂片、细胞的检测。
一、染色工作液的配制:
1.根据样本数量,用37℃培养箱预热的HBSS 将DIOC16(3)PERCHLORATE荧光染料400-2000倍稀释,配制成染色工作液。
【注】:
● 也可以直接用相应的无血清培养基或其他缓冲液稀释DIOC16(3)PERCHLORATE染料至所需浓度。
● 开始实验前,使用无血清培养基或HBSS缓冲液稀释染料储存液到需要的工作浓度。工作浓度应根据不同细胞的预实验结果确定的最佳工作浓度,建议至少在超过10倍范围的浓度下进行测试。一般染色终浓度400-2000倍稀释,1000-2000倍适合大多数细胞样本。
● 建议收到产品后,根据单次使用量,对母液进行小量分装,每次使用一管,试剂-20℃避光冻存,一年稳定。
● 工作液现配现用。
● 为了降低探针加载过度可能引起的假阳性,建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。
● 若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育,荧光信号会衰减。
二、细胞染色
A:悬浮细胞染色
1.用PBS洗涤细胞2次。
2.加入适量体积的染色工作液重悬细胞,使其密度大约为1×106/mL。
3.在37℃孵育细胞 5~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。可以用20分钟作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
【注】:
● 若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间。
4.孵育结束,500 g离心5分钟。
5.倾倒上清液,再次缓慢加入37℃预热的培养液重悬细胞。
6.重复(4),(5)步骤两次以上
B:贴壁细胞染色
1.用PBS 洗涤细胞2次。
2.细胞培养板中或细胞爬片上加入适量体积的染色工作液。
【注】:
● 96孔细胞培养板每孔加入100μl染色液即可。
3.37℃孵育细胞 5~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。可以用20分钟作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
【注】:
● 若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间。
4.吸干染色工作液,用培养液洗培养板或盖玻片2~3次,每次用预热的培养基覆盖所有细胞,孵育5~10分钟,然后吸干培养基。
三、用荧光显微镜或流式细胞仪检测
最大激发波长为488nm,最大发射波长为500nm。
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文献和实验四、醋酸洋红染液 将洋红粉末1g倒入100mL45%醋酸溶液中,边煮边搅拌,煮沸(沸腾时间不超过30s),冷却后过滤,即可使用。也可再加入1%~2%铁明矾水溶液5-10滴,至此液变为暗红色而不发生沉淀为止。如制作永久标本染色时,可加入饱和氢氧化铁或醋酸铁(媒染剂)溶液数滴,至染色液呈浅蓝色为止。 五、硫堇染液(工作液) ①干液(硫堇):硫堇1g或2g溶于100mL 50%乙醇中,溶解后过滤备用; ②醋酸钠缓冲液:醋酸钠・3H2O 9.7g,巴比
附录I 染色液的配制 一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液 (实验6,53) A液:美蓝(methylene blue) 0.6g 95%酒精 30ml B液:KOH 0.01g 蒸馏水 100ml 分别配制A液和B液,配好后混合即可。 二、齐氏 (Ziehl)石炭酸复红染色液 (实验6) A液:碱性复红(basic
。配制方法如下:一、用乙酸配制成分:0.1%(w/v)丽春红,5%(v/v)乙酸,ddH 2 O。 4 ℃保存,不要冻上。也可以配成“0.2%(w/v)丽春红,3%(v/v)乙酸,ddH 2 O”。 二、用三氯乙酸和5-磺基水杨酸成分:2% (w/v)丽春红,30%的三氯乙酸,30%的5-磺基水杨酸。
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