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- JLC-E1202
- 进口/国产
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 保质期：
3个月
- 供应商：
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 保存条件：
4℃
- 规格：
500ml
产品简介：
Western转移缓冲液又称蛋白印迹转移缓冲液或转膜缓冲液，适用于Western Blot实验中把蛋白质转移到PVDF膜或硝酸纤维素(NC)膜上，以便进行抗体的孵育和下游实验。
Western转移缓冲液主要成分为Tris、甘氨酸等，不含。不适用于把蛋白质转移到尼龙膜上，该试剂为10×溶液。
Western转移缓冲液(10×)
操作步骤(仅供参考)：
1、 按Western转移缓冲液(10×)::蒸馏水=1:2:7的比例，配制1×转移工作液。
2、 大多数蛋白质转移，应置于4℃进行，以防止蛋白降解。
Western转移缓冲液(10×)
注意事项：
密闭保存，开启后尽快用完。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验过硫酸胺 0.1 g ，加超纯水1.0 mL 溶解后，4 ℃ 保存，保存时间为 1 周。（-20 ℃长期保存） 30% 丙烯酰胺 溶于总体积为 50 mL 的水中，定容至 100 mL。室温保存于棕色瓶。 10× PBS（2L） NaOH 调 pH 值至 7.4，定容至 2 L。保存于室温。 还原型 5×SDS 上样缓冲液 混匀后，分装于 1.5 mL 离心管中，4 ℃ 可保存数周，-20 ℃ 可长期保存。 电泳液缓冲液 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 室温保存，1 次溶液可重复
杂交膜的选择是决定 Western blot成败的重要环节。应根据杂交方案、被转 移蛋白的特性以及分子大小等因素，选择合适材质、孔径和规格的杂交膜。用于Western blot的膜主要有两种：硝酸纤维素膜(NC) 和 PVDF 膜。NC 膜是蛋白印迹实验的标准固相支持物，在低离子转移缓冲液的环境下，大多数带负电荷的蛋白质会与膜发生疏水作用而高亲和力的结合在一起， 但在非离子型的去污剂作用 下，结合的蛋白还可以被洗脱下来。根据被转移的蛋白分子量大小，选择不同孔 径的 NC 膜。因为随着膜孔径的不断
glycine, 0.04% SDS, 20%甲醇， 两类膜可供选择：硝酸纤维素膜和PVDF膜（正电荷尼龙膜），根据不同需要选择（下表），PVDF膜需要浸泡甲醇中1-2分钟，再孵育于冰冷的电转缓冲液中5分钟，胶也需在冰冷的电转缓冲液中平衡3-5分钟，否则转膜时会导致条带变形。 注：大蛋白和小蛋白的转膜 电转移缓冲液中SDS与甲醇的平衡、蛋白的大小、胶的浓度都会影响转膜效果，如下调整可以增加转膜效率： 大蛋白（大于100 KD） 1．
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