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UE总RNA小量制备试剂盒
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UE-MN-MS-RNA-50/UE-MN-MS-RNA-250
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产品货号: UE-MN-MS-RNA-50/UE-MN-MS-RNA-250
产品规格: 50T/250T产品概述:储存条件Buffer R-I:细胞裂解液。室温密闭贮存。Buffer R-II:中和液。室温密闭贮存。Buffer W1A concentrate:洗涤液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇)。混合均匀,室温密闭贮存。Buffer W2 concentrate:去盐液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇)。混合均匀,室温密闭贮存。Buffer TE(DNase & RNase-free):洗脱液。10 mM Tris-HCI, 0.1 mM EDTA, pH 7.5。室温密闭贮存。流程图常见问题解答:◆RNA提取得率低·该组织或者细胞中RNA含量偏低不同细胞和组织中RNA的丰度不同,如肝脏,胰腺,心脏等是高丰度组织(总RNA含量2-4 µg/mg),脑,胚胎,肾脏,肺,胸腺,卵巢等是中丰度组织(总RNA含量0.05-2 µg/mg),膀胱,骨,脂肪等是低丰度组织(总RNA含量<0.05 µg/mg)。·组织起始量太少或者太多样品量过少,则细胞组织中RNA含量较低;样品量过多则可能超过裂解液的裂解能力,裂解将不完全,从而导致RNA得率低。·取样为上清液时,尽量吸尽上清(如细胞培养上清)。·洗脱液温度过低可以将洗脱液在65℃预热后使用。◆OD260/OD280比值偏低·蛋白质污染在加入R-II中和离心后避免将沉淀物转移到RNA结合膜上。·用水稀释样品RNA应使用TE Buffer稀释后再进行吸光度值的测定,低离子强度或低pH值溶液会使OD280值升高。·多糖或多酚的残留一些特殊的组织和植物中,多糖、多酚含量较多,这些残留也会导致OD260/OD280比值偏低。因此,从这类材料中提取RNA时,需要注意多糖、多酚杂质的去除。·确定Buffer W1A和Buffer W2中加入的乙醇是否是100%无水乙醇/95%乙醇,加入体积是否正确。◆RNA降解·材料保存不当使用的组织材料不够新鲜。提取RNA的组织材料应采用新鲜的组织材料,或将新鲜的组织材料用液氮迅速冷冻后置于-80℃保存。绝不能未经液氮速冻而直接保存于-80℃冰箱中。·裂解液用量不足如果试剂没有问题,且外源性污染也可以排除,那么降解几乎都来自裂解液的用量不足。如果将裂解液直接加入培养皿中裂解样品,一定要使裂解液完全浸没样品。·特殊材料某些富含内源核酸酶的样品(如肝脏,胸腺等),即使使用电动匀浆器匀浆也不能避免RNA的降解。更可靠的方法是:在液氮条件下将组织研碎,并且匀浆时使用更多裂解液。·外源RNA酶的污染试剂,器械及实验环境中的RNA酶进入实验系统。·内源RNA酶的污染实验样品过多;匀浆时温度过高。◆基因组DNA污染·样品用量过多样品用量超出了裂解液Buffer R-I的处理范围。请选择合适的样本处理量。·样品中含有有机溶剂(如乙醇、DMSO等)避免这些会引起裂解液性质改变的物质。·加入Buffer R-II离心后,取上清时避免吸入沉淀。
产品货号:UE-MN-MS-RNA-50/UE-MN-MS-RNA-250
应用范围:核酸提取及纯化
产品货号:UE-MN-MiRNA-50/UE-MN-MiRNA-250
产品货号:UE-MN-BL-RNA-50/UE-MN-BL-RNA-250
产品货号:UE-MX-MS-RNA-10/UE-MX-MS-RNA-25
产品货号:UE-MD-MS-RNA-10/UE-MD-MS-RNA-25
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