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- 2025年11月14日
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说明：MagneSil® Total RNA mini-Isolation System (MagneSil® 总 RNA 小量纯化系统) 可从较少的组织培养细胞( ≤ 1×105 细胞)、组织( ≤ 2mg/100ml 组织裂解液) 或新鲜全血( ≤ 20ml) 中高通量(96 孔板) 地纯化出完整的总RNA，方法简单、快速。该系统可在多个液体自动处理工作站上进行高通量纯化。也可采用384 孔板从组织培养细胞( ≤ 1×103 细胞) 及新鲜全血( ≤ 5ml) 中纯化总RNA。纯化过程不需真空抽滤、离心及沉淀步骤。在自动化液体处理工作平台上，对96 孔板样品总RNA 的纯化可在30 分钟内完成。MagneSil® 总RNA 小量纯化系统纯化获得的总RNA 适用于多种分子生物学应用，包括终点RT-PCR 及实时RT-PCR。
特点
• 高效率：在Beckman Coulter Biomek® 液体处理自动化平台上，可在30 分钟内完成对96 孔板样品总RNA 的纯化，或在50 分钟内完成对384 孔板样品总RNA 的纯化。
• 提高实时PCR 性能：体积小于15ml 的洗脱液中包含浓缩的 RNA，无需耗时的真空浓缩。
• 质量可靠：纯化过程包含DNase Ⅰ处理步骤，用以去除基因组 DNA 污染。
• 便捷：在自动化平台上启动自动操作程序后无需手工操作。
• 自动化操作程序：获取经确认的自动化操作程序： www.promega.com/automethods/。
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文献和实验化锂将RNA 沉淀出来；2)，直接在酸性条件下抽提，酸性下DNA与蛋白质进入有机相而RNA 留在水相。第一种提取方法将导致小分子量RNA 的丢失，目前该方法的使用频率已很低。方法一:总RNA 的试剂盒快速提取一些公司推出的总RNA 提取试剂盒，可以用来制备高质量的可用于建库的RNA 。该总RNA 纯化系统采用两种著名的RNA 酶抑制剂，异硫氰酸弧(GTC)和β-巯基乙醇，加上整个操作都在冰浴下进行，这样就能显著降低RNA 的降解速率。GTC和N-十二烷基肌氨酸钠的联合使用，将促使核蛋白复合体的解离
指轻弹管底助溶，有可能完全溶解，再回复至室温时则不会再析出沉淀。也有可能始终无法完全溶解，这大概是由于RNA溶液实在太浓。 14.用Parafilm膜将离心管盖封死，将离心管装于一专门的离心管盒(或其他适合的容器)中，保存于-70℃。避免反复冻融。 3.异硫氰酸胍小量抽提法 本方法基本参照《精编分子生物学实验指南》第125-126页，有简化，起始样品可低达50mg。 1. 试剂 2. 操作
%乙醇）。 8. 离心：7500g，5min，4度。 9. 倒弃上清，重复7、8。 10. 干燥：通风厨内，室温下5-10min。不能彻底干燥。 11. 稀释：逐步小量DEPC水稀释沉淀，至完全溶解，一定要均一。置于冰上，不用则冻于-80度。 此种方法是改进了RNA提取过程的细节过程，最终提取到的RNA的OD260/OD280一般都能保存在1.8左右。
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