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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
UE血基因组DNA小量制备试剂盒
- CAS号:
血基因组DNA小量提取试剂盒
- 供应商:
UE-MN-BL-GDNA-50
- 库存:
大量
- 规格:
50T
产品货号: UE-MN-BL-GDNA-50/UE-MN-BL-GDNA-250
产品规格: 50T/250T
产品概述:
储存条件
Buffer AP1: 细胞裂解液,室温密闭贮存。
Buffer AP2: 蛋白沉淀液,室温密闭贮存。
Buffer W1 A concentrate: 洗涤液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇)。混合均匀,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate: 去盐液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇)。混合均匀,室温密闭贮存。
Buffer TE : 5 mM Tris-HCI,0.1 mM EDTA,pH 8.5。室温密闭贮存。
流程图
常见问题解答:
◆洗脱产物的DNA量很少或没有
·血样品中白细胞含量过低
·Buffer AP1裂解不充分
·加入Buffer AP2后没有充分混匀
·DNA没有有效的被洗脱
·血液不新鲜或者出现凝固
◆A260/280比值过低
·Buffer AP1裂解不充分
·与Buffer AP2没有充分混匀
·Buffer AP1与BufferAP2添加次序错误
·血液在室温中存放过长时间
◆基因组DNA有降解
根据降解的完整性,在琼脂糖凝胶电泳中基因组DNA要么呈现一条糊状条带要么是大分子量条带前的一个拖尾现象。在这个纯化过程中任何的物理作用都不会有效的造成视觉上可见的降解,引起这种情况的大多数可能来源于酶。酶引起的降解可能是血样品长时间或者不当的储存导致的或者未能有效抑制内源核酸酶作用。
◆基因组DNA酶反应效果不佳
·DNA浓度低
·盐分污染
可以用2× Buffer W2进行洗涤
·乙醇污染
在最后一次Buffer W2 洗涤后可将制备管由原来离心1min增加至离心 2min。
◆制备管堵孔
·血液样品中白细胞的含量过高
·Buffer AP1裂解不充分
·与Buffer AP2没有充分混匀
·放血后血液混匀不充分,导致凝血
·冷冻或者室温保存过长时间的血中会形成沉淀物
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP305 植物基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物叶片 研钵 液氮2. 无水乙醇 巯基乙醇3. 移液器及配套无菌枪头(10 μl, 200 μl ,1ml),1.5 ml离心管4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,实验准备-试剂盒准备1:使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。实验准备-试剂盒准备2:准备实验时,将缓冲
、Ribonuclease H(核糖核酸酶H) 22、Nova in vitro Transcription KitⅠ(Nova 体外转录试剂盒) 23、DL2000 DNA Marker 24、DL5000 DNA Marker 25、DL10000 DNA Marker 26、Lambda DNA/ Hind III DNA Marker 27、QuickSpin Blood Genomic DNA Mini Kit(血液基因组DNA小量提取试剂盒) 28、QuickSpin Tissue/Cell
测试5个样本,均为保存7,8年的陈旧血,且反复冻融,有的血颜色很淡,稀薄。这是艾德莱产品(DN01)500ul全血提取结果(2微升DNA上样,marker 4微升)。胶孔无任何残留。进一步优化操作步骤后,质量更好,轻松上芯片。 用户从前使用QIAGEN的盒子,大部分提的DNA胶图上孔里残留较多的蛋白,纯度差,产量偏低,不能上芯片。下图是一个QIAGEN DNA电泳图(上样孔明显杂质残留)。 结论:艾德莱的试剂盒性价比远超QIAGEN数倍,上芯片分析首选艾德莱全血提取试剂盒!
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