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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 库存:
54
- 生长状态:
悬浮生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
详见说明书
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
淋巴母细胞样
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 英文名:
小鼠杂交瘤细胞株;FQ-E7
- 规格:
株
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞株;FQ-E7品牌
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:
3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
小鼠杂交瘤细胞株;FQ-E7品牌冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
小鼠杂交瘤细胞株;FQ-E7品牌培养操作步骤
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
小鼠杂交瘤细胞株;FQ-E7品牌实验要点及说明
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
Rabbit Anti-Biotin/FITC FITC标记的兔抗生物素抗体IgG 0.1ml
phospho-TRAP220/MED1(Thr1457) 磷酸化甲状腺受体相关蛋白220抗体 0.1ml
phospho-SYT1(Thr202) 磷酸化突触结合蛋白1抗体 0.1ml
DISC1 (CT) DISC1 C端抗体 0.2ml
CDC2L1 细胞分裂周期蛋白2亚型1抗体 0.2ml
Phospho-Wee1(Ser123) 磷酸化WEE1蛋白抗体 0.1ml
Rabbit Anti-Biotin/PE PE标记的兔抗生物素抗体IgG 0.1ml
IFI44 干扰素诱导蛋白44抗体 0.2ml
COLEC11 凝集蛋白家族11抗体 0.2ml
Met Enkephalin 甲硫氨酸脑啡肽抗体 0.2ml
SCYLV 甘蔗SCYLV抗体 1ml
小鼠杂交瘤细胞株;FQ-E7品牌R-Palmitoyl-(1-methyl) Ethanolamide (5 mg)N-(2-hydroxy-1R-methylethyl)-hexadecanamide; R-1 PMA; R-Palmitoyl-(1-methyl) Ethanolamide
Docosahexaenoic Acid (50 mg)4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z-docosahexaenoic acid; Cervonic Acid|DHA; Docosahexaenoic Acid
Oleic Acid (10 g)9Z-Octadecenoic acid; Oleic Acid
9(S)-HODE (500 ug)9S-hydroxy-10E,12Z-octadecadienoic acid; 9(S)-HODE
L-胱氨(500GM)L-Cystine, CAS# 56-89-3; MW 236.15; ≥99%
N-[4-[[[[Tetrahydro-4-(4-methoxyphenyl)-2H-pyran-4-yl]methyl]amino]carbonyl]phenyl]-2-furancarboxamideJW55
4,4-Difluoro-8-(4-ethynylphenyl)-1,3,5,7-tetramethyl-4-bora-3a,4a-diaza-s-indaceneBODIPY-Acetylene Reagent
(2S,5S)-1,2,4,5,6,8-Hexahydro-5-(hydroxymethyl)-1-methyl-2-(1-methylethyl)-3H-pyrrolo[4,3,2-gh]-1,4-benzodiazonin-3-one(-)-Indolactam V
EGFR Inhibitor (1 mg)Epidermal Growth Factor Receptor Inhibitor; N-[3-[[6-[[3-(trifluoromethyl)phenyl]amino]-4-pyrimidinyl]amino]phenyl]-cyclopropanecarboxamide
Robotnikinin (1 mg)N-[(4-chlorophenyl)methyl]-5,12-dioxo-2R-phenyl-1-oxa-4-azacyclododec-8E-ene-6S-acetamide; Robotnikinin
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文献和实验由于过度生长而死亡。因此制备鼠杂交瘤工作繁重且无法标准化及大规模生产。 在上世纪八十年代,制备一株鼠单抗并鉴定就可以成为一个博士论文的内容。1998 年,我们团队用新开发的兔杂交瘤融合细胞株在转基因小鼠上开展乳腺癌靶标研究,制备了上百个兔杂交瘤融合细胞的培养板。由于培养箱拥挤,一名实验员将其中的二十板杂交瘤细胞放在了其他实验室的培养箱,直到 6 周后(兔杂交瘤筛选应在 3~4 周),我在统计分析实验结果时才发现少了这二十板杂交瘤。按常理,这个时候这些杂交瘤细胞肯定全死了!但当实验员准备扔掉这二十板细胞
Koehler和Milstein合作,选择经绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞和在体外培养的能持续繁殖的小鼠骨髓瘤细胞融合,最终获得具有两种亲本细胞各自特点的杂交细胞,建立了第一个B细胞杂交瘤细胞株,它既能分泌特异性抗绵羊红细胞抗体,又能在体外培养永久传代。他们在Nature杂志上联名发表的题为“分泌预定特异性抗体的融合细胞持续培养”的著名论文,宣告单克隆抗体的诞生,该项成果荣获1984年度诺贝尔医学奖和生理奖。近年来,随着基因工程抗体的问世,使其临床研究与应用获重大的突破。迄今,全世界已经研制成数以千计的单克
在液氮中保存的细胞株及体外传代培养的细胞株,都需要定期检查染色体数和抗体产生能力,因有些杂交瘤细胞会逐渐丢失染色体,使产生抗体的能力丧失或减弱。此时需及时进行克隆化,保留稳定分泌抗体的细胞株。 一、杂交瘤细胞染色体检查 材料和试剂 1. 秋水仙素。 2. 甲醇,冰醋酸。 3. Giemsa染液,玻片。 操作步骤 1. 取传代培养24h的细胞,加0.1ml秋水仙素,放37℃水浴4h。 2. 收集细胞2000r/min×10min离心弃上清,沉淀
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