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- 上海研生
- YS-S0859
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- 2025年10月05日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
详见说明书
- 细胞类型：
B类
- 肿瘤类型：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 库存：
56
- 生长状态：
半贴壁生长
- 年限：
详见说明书
- 运输方式：
详见说明书
- 器官来源：
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 细胞形态：
淋巴母细胞样
- 免疫类型：
详见说明书
- 物种来源：
详见说明书
- 相关疾病：
详见说明书
- 组织来源：
详见说明书
- 英文名：
小鼠杂交瘤细胞(抗CD3)；OKT3
- 规格：
株
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞(抗CD3)；OKT3品牌
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 可产生抗CD3的单克隆抗体
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1：
2传代。
传代情况
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 B类
小鼠杂交瘤细胞(抗CD3)；OKT3品牌培养方法：
收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况，如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，留10ml培养液继续培养。
培养实验又要开始了，科研工作者又该忙碌了，大家可能都在寻找适合自己的细胞，不用急，我们帮您掌舵，让您满意！
传代方法：细胞完全汇合时，倒掉旧液，加入消化液（0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA）2ml消化，显微镜下观察细胞完全脱离瓶壁分离成单个细胞后弃掉胰酶，加培养基混匀分瓶，T25瓶中加培养基至6-8ml，T75瓶加培养基至20ml，37℃，5%CO2孵箱培养。
小鼠杂交瘤细胞(抗CD3)；OKT3品牌注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和 Procell 技术 部 沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联 系，告知细胞的具体情况，以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。
小鼠杂交瘤细胞(抗CD3)；OKT3品牌培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
以下是小鼠杂交瘤细胞(抗CD3)；OKT3品牌的相关产品：
人 RAB35 基因全长ORF克隆
人 PEX13 基因全长ORF克隆
人 CD309 / VEGFR2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
人 NANOG 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
人 TP63 基因全长ORF克隆
人 RTN4RL1 基因全长ORF克隆
人 CROT (474 Leu/Val) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 DLL1 / Delta-like 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人 STK17B 基因全长ORF克隆
人 TFAP2C 基因全长ORF克隆
大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 Cadherin-8 / CDH8 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠杂交瘤细胞(抗CD3)；OKT3品牌5-（3-Methylphenoxy）-2（1H）-pyrimidinone； CID-39065； NSC314335； CP-26154； TolimidoneMLR-1023
6-（1H-indazol-6-yl）-N-（4-morpholinophenyl）imidazo[1，2-a]pyrazin-8-amine； EntospletinibGS-9973
Indole 3-propionamideIPAM
（±）8，9-DHET （50 ug）（±）8，9-dihydroxy-5Z，11Z，14Z-eicosatrienoic acid； （±）8，9-DiHETrE； （±）8，9-DHET
ML-265 （1 mg）6-
JWH 018 N-（4-oxo-pentyl） metabolite （5 mg）5-（3-（1-naphthoyl）-1H-indol-1-yl）pentan-2-one； JWH 018 4-keto metabolite； JWH 018 N-（4-oxo-pentyl） metabolite
KN-93 （hydrochloride） （10 mg）（E）-N-（2-（（（3-（4-chlorophenyl）allyl）（methyl）amino）methyl）phenyl）-N-（2-hydroxyethyl）-4-methoxybenzenesulfonamide， monohydrochloride； KN-93 （hydrochloride）
9（R）-HODE cholesteryl ester （50 ug）9R-hydroxy-10E，12Z-octadecadienoic acid， cholesteryl ester； 9（R）-HODE cholesteryl ester
L-半胱氨盐盐一水物（500GM）L-Cysteine， Hydrochloride， Monohydrate， CAS# 7048-04-6； MW 175.3； USP
Heparin SepharoseHeparin Sepharose
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文献和实验【原创】实验方法分享：用某品牌rProtein A填料有效纯化小鼠腹水单抗
(PBS+1M NaCL,pH7.5-8) 的缓冲液置换0.3ml该品牌rProteinA填料的storage buffer。 2，用binding buffer等体积稀释小鼠腹水1ml（15ml离心管），10000RPM离心15分钟 3，取离心上清，把步骤1中的填料加入，室温在摇床上晃匀5-60分钟（时间越长，温度37度，能提高抗体和填料的结合率，此次实验中就晃了5分钟，导致流穿中还有一点点抗体残留;） 4,3-5000RPM离心1-3分钟，沉降填料，吸去上清（流穿） 5，加入10
，无菌复溶 9. 淋巴细胞M密度梯度分离液（Accurate Chemical and Scientific），室温 10. RPMI-10完全培养基 11. FITC标记的抗CD3抗体和PE标记的PK136抗体（PharMingen） 12. 15ml和50ml带盖聚丙烯锥底离心管 13. Beckman CS-6R离心机（或同类离心机） 14. 血清学吸管 实验方法： 1. 处死小鼠，无菌取脾脏。 2. 制备脾脏
―杂交瘤技术、DNA重组技术等。 单抗的制备首先将抗原注射人小鼠体内，然后从小鼠脾脏中获得能够产生抗体的B细胞，与小鼠骨髓瘤细胞在灭活的仙台病毒或聚乙二醇的诱导下融合，再在特定的选择性培养基中筛选出杂交瘤细胞。由于杂交瘤细胞继承了双亲细胞的遗传物质，因此，它不仅具有B细胞分泌特异性抗体的能力，还有骨髓瘤细胞在体外培养条件下大量增殖的本领。由此可以获得足够数量的细胞。 单抗的制备过程 1，抗细胞表面分子的单抗 这类抗体能识别和结合表达特定膜表面分子的细胞
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