干FA缓冲

RNA甲醛变性胶电泳

即水饱和的溴酚蓝液。在15ml灭菌离心管中，依次加入以下各种成分：4.0ml 10 × FA buffer3.1ml 甲酰胺2.0ml 100%的甘油720ul 37%的甲醛80ul0.5M的 EDTA （PH 8.0）16ul 水饱和的溴酚蓝100ul DEPC水混匀，分装，-20℃保存，常用放4℃保存。5、1×甲醛变性胶电泳缓冲液（1×running buffer）：20 ml 10×FA gel buffer，4.0 ml 37%的甲醛，176 ml水，放入电泳槽中使用，一般在3次电泳结束后需

RNA甲醛变性胶电泳检测RNA质量的实验方法

5、1×甲醛变性胶电泳缓冲液（1×running buffer）：20 ml 10×FA gel buffer，4.0 ml 37%的甲醛，176 ml水，放入电泳槽中使用，一般在3次电泳结束后需更换此电泳缓冲液。 6、1.2%的甲醛变性胶：称0.4克琼脂糖，加入3.34 ml 10×FA gel buffer，加入30 ml DEPC水，微波炉融化，肉眼观察无颗粒状悬浮物。冷却至约50-60℃，再加入600 l甲醛，倒入7.5×5.0 cm的凝胶模具中。插入合适长度和宽度的梳子，室温

核蛋白染色时保留细胞质，报告蛋白荧光的改进方法

分泌。 随后进行表面染色：先以Fc阻断剂（2.4G2克隆，5 μg/mL）处理10分钟，再于4°C避光孵育15分钟，使用含1% BSA和0.1% NaN₃的DPBS缓冲液配制抗体，常用组合包括CD90.2、CD4、CD8、CD25、CD11b和CD45.2等标记。 固定步骤采用2%甲醛（FA，由含<3%甲醇的4% Roti-Histofix稀释），室温孵育40–60分钟。破膜与胞内染色使用0.1%皂苷缓冲液或1×Perm缓冲液，加入抗FoxP3、T-bet、RORγt、IL-17A或IFN-γ等抗体，4°C