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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
433
- 英文名:
Total RNA Extraction Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
- 规格:
50T|100T
特别提示:包括总RNA提取试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:总RNA提取试剂盒
英文名称:Total RNA Extraction Kit
产品货号:QN0926
产品规格:50T|100T
操作步骤:
1. 样品处理:
a. 植物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混匀。
b. 动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。
c. 贴壁细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每106细胞加1ml 裂解液。用取样器吹打混匀。
d. 细胞悬液:离心收集细胞。每106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml裂解液混匀。
e. 血液处理:取0.2-1ml新鲜血液加3倍体积红细胞裂解液,混匀后室温放置10分钟,10000rpm离心1分钟。弃上清,若沉淀含有红细胞,可加入2倍体积红细胞裂解液重复裂解步骤。离心后沉淀加入1ml裂解液混匀。
2. 将处理后的样品在室温放置5分钟,使得核酸蛋白复合物完全分离。
3. 向匀浆样品中加0.2ml*仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置3-5分钟。
4. 2~8℃ 12000rpm离心10分钟。RNA主要在上层无色的水相中,把水相转移到新管中,不要吸到沉淀。
5. 吸附柱前处理:在吸附柱中加入500ul 洗柱液,室温放置2分钟,2~8℃ 12000 rpm离心2min,弃废液。
6. 第4步收集的上清中加入200ul无水乙醇混匀,加入吸附柱静置2分钟,2~8℃ 12000rpm离心2min,弃废液。
7. 向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),2~8℃ 12000rpm离心2min,弃废液。
8. 向吸附柱中加入600ul漂洗液,2~8℃ 12000rpm离心2min,弃废液。
9. 12000rpm离心2min,弃掉收集管,将吸附柱置于室温放置数分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除。
10. 将吸附柱放入新管中,向膜中央滴加50-100ul RNase free ddH2O,室温放置5min,12000rpm室温离心2min即得到RNA。
注意事项:
1,所有相关器皿耗材都应为RNase-free产品,操作过程要小心,带口罩、手套避免环境中RNA酶污染样品。
2,RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA不纯,需电泳检测。
储存条件:2~8℃
除了总RNA提取试剂盒,,我公司还供应以下相关产品:
| 货号 | 名称 | 规格 |
| BTN71201 | 动物RNA提取试剂盒(柱式Trizol) | 50次 |
| BTN100805C | 酸酚-*仿-异*醇混合液(RNA提取用) | 250mL |
| WE0200 | 植物RNA提取试剂盒(含DNase I) | 50次 |
| WE0202 | 新型植物RNA提取试剂盒(含DNase I) | 50次 |
| ALH001 | 细胞组织总RNA提取试剂 | 50ml|100ml |
| ALH015 | 全血总RNA提取试剂盒 | 20次|50次 |
| ALH027 | 细菌RNA提取试剂盒 | 20次|50次 |
| ALH036 | 植物RNA提取试剂盒(含DNA清除柱) | 20次|50次 |
| SY0269 | 总RNA提取试剂(同Trizol) | 100ml |
| SY0274 | 快速核酸银染试剂盒 | 1000ml |
| GL1246 | P:C:I(125:24:1,pH﹤5.0) | 100ml |
| GL1250 | 革兰阳性菌裂解缓冲液 | 100ml |
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文献和实验实测植物总RNA提取液套装提取土豆、桑叶中的RNA 一直以来,搞植物研究的同学们对Trizol试剂提取植物RNA诟病不断,在这样的背景和需求下,我们特别研发了植物总RNA提取液套装,套装中除了植物总RNA提取液外,还包括了Buffer EX(氯仿替代品),RNA沉淀液(异丙醇替代品)以及β-巯基乙醇。真可谓一个套装在手,提取植物RNA无烦恼!现在我们特别选择了土豆块茎(Trizol试剂提取失败)和桑叶(Trizol试剂提取效率极低)两个典型样本实测植物总RNA提取液套装的效果。 实验目的
在收集到生物材料之后,最好能即刻进行RNA 制备工作。若需暂时储存,则应以液氮将生物材料急速冷冻后,储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA 时,将储存于冷冻柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破细胞,不可以先行解冻,以避免RNase 的作用。 1. 提取组织RNA 时,每50~100mg 组织用1ml Trizol 试剂对组织进行裂解;提取细胞RNA 时,先离心沉淀细胞,每5-10 �106 个细胞加1ml Trizol 后,反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞; 2. 将上述组织或细胞
问:请问大家提取酵母的总RNA都用什么方法?有好用的试剂盒吗?酵母总RNA提取应该注意什么?答:使用热酚法抽提酵母RNA,很好用,至今没有失败过。(1) 将酵母细胞培养在3ml选择性培养基中,30℃过夜旋转培养。(2) 稀释过夜培养的菌液,重新在10ml培养基中培养细胞。(3) OD600达到1.0时,收菌,4000rpm/min离心5min,弃培养基。(4) 将细胞悬浮于400μl AE缓冲液(50mM Sodium Acetate,10mM EDTA 调整pH值至5.2
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