柱式探针纯化试剂盒

本试剂盒是基于分子排阻层析原理的、专门用于纯化同位素和非同位素标记的核酸探针的试剂盒。在分子排阻层析过程中，大分子(标记的核酸探针或Oligo探针)将绕过层析介质，快速穿透出层析柱，小分子(未参入的核苷酸)将进入层析介质中，缓慢穿透出层析柱。根据这一时间差而将两者分开。此过程的示意图如下：


产品特点：
1. 即开即用，提供纯化所需要的所有溶液和介质，不需要单独准备每种试剂，免去用户自己摸索条件。
2.适用于PCR 标记、随机引物标记、切口平移和填入法标记。
3. 能去掉绝大部分的未标记物、盐离子等小分子。
4. 足够10次纯化使用，每次可以纯化50μl的标记反应液。
5.可用于DIG、生物素、Cy3、Cy5等非同位素标记的DNA和RNA探针(由于标记分子带非极性基团，容易进入有机相，因此这些探针不能用传统的酚氯仿抽提-乙醇沉淀法纯化)。

试剂盒组成：

成分	规格
Sephadex G50 介质	15ml
0.7mL离心柱及管套	10套
TE溶液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
注意：由于非同位素标记的探针浓度一般都比较低，非常容易吸附到枪头或离心管的表面，造成探针的损失，因此最好使用硅化的离心管和枪头。

1. 摇晃Sephadex G50介质至均匀，迅速转移0.5mL 到离心柱中，套上套管(又叫收集管)。
2. 2000rpm室温离心1分钟，Sephadex G50介质将压紧在柱子里面。
3. 倒掉套管中的穿透液，再加0.5mL的摇晃后得到的Sephadex G50 介质，2000rpm室温离心1分钟。
4. 经上述步骤会得到体积约为0.5mL 压紧后的Sephadex G50介质。如不足，再加入少量的G50介质离心，直到体积达到0.5mL左右。倒掉套管中的穿透液。
5.在柱子中Sephadex G50 界面的上面加入50μl TE缓冲液，套上套管，2000rpm室温离心1分钟，测量收集管中穿透液的体积。
6. 重复上步3-5次，直到收集管中穿透液的体积跟加入的体积一样(50μL)。
7. 将50μl的标记探针(必须使用50μl样品。如果没有50μl，需要用TE缓冲液或水补足到50μl)加到柱子中Sephadex G50 界面的上面，套上一个自备的(最好是硅化的)离心管。
8. 2000rpm室温离心1分钟，离心管中的穿透液将含标记探针，未参入的标记物将滞留在介质中。
9.电泳或点杂交检测探针回收效率后直接使用或放-20℃长期保存。