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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
345
- 英文名:
FspEI Restriction Endonuclease
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
1KU|200U
特别提示:包括FspEI限制性内切酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:FspEI限制性内切酶
英文名称:FspEI Restriction Endonuclease
产品货号:SV0379
产品规格:1KU|200U
特性:
重组酶,EpiMark验证
概述:
FspEl 是经 EpiMark验证过的产品,是一种修饰依赖型核酸内切酶,能够识别 CmC 位点并能在修饰的胞嘧啶 3´ 侧 N12/N16 处切割双链 DNA。能被识别的胞嘧啶修饰包括:C5-甲基化胞嘧啶(5-mC)和 C5-羟甲基化胞嘧啶(5-hmC)。
反应条件:
1X BalbBuffer 4 + BSA + 1X 酶活性液,37℃温育。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
5,000units/ml。
注意事项:
延长酶切时间可能会出现星号活性。
除了FspEI限制性内切酶,,我公司还供应以下相关产品:
名称:尿嘧啶切刻酶
货号:BTN130666
规格:50U
本产品在尿嘧啶位置产生一个单核苷酸缺口,它是尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)和DNA糖基化酶-裂解酶 Endo Ⅷ的混合物。UDG催化尿嘧啶碱基的切割,形成一个脱碱基(脱嘧啶)位点,但保持磷酸二酯骨架结构完整。Endo Ⅷ的裂解酶活力使脱碱基位点 3′和5′端的磷酸二酯键断裂,释放无碱基的脱氧核糖。其反应示意图如下:
产品特点:
1.PCR产物的克隆;
2.在DNA的尿嘧啶处产生缺口。
产品组成:
| 成份 | 规格 |
| 尿嘧啶切刻酶(1000U/mL) | 50μL |
| 10×Buffer | 1mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指在10μl反应体系中,37℃条件下,15分钟使10pmol的含有单一尿嘧啶碱基的34bp寡核苷酸双链产生切刻所需要的酶量。
名称:BmgBI限制性内切酶
货号:SV0139
规格:2500U|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: <10%
BalbBuffer 2.1: 10%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 10%
特性:
重组酶、省时酶。
反应条件:
BalbBuffer 3.1,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
注意事项:
BmgBl是Btrl的完全同裂酶。由于 BmgBl的识别位点是非回文结构,被 BmgBl 切割的片段,连接后只有 50%的产物能重新生成 BmgBl 识别位点。
甘油浓度>5% 条件下可能出现星号活性。
名称:BstNI限制性内切酶
货号:SV0260
规格:15KU|3KU|1500U
在不同反应缓冲液的活性
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 75%
特性
重组酶、省时酶。
反应条件
BalbBuffer 3.1,60℃。
浓度
10,000units/ml。
37℃ 时活性
30%。
甲基化敏感性
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项
BstNl是EcoRll的不完全同裂酶,二者有不同的切割位点。EcoRll 在两个 C 碱基的前面切割。
由于 BstNl 切割产生的 DNA 片段含有单碱基的 5´突出端,比平末端更难连接。
名称:MseI限制性内切酶
货号:SV0491
规格:2500U|2500U|500U|250U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 75%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 75%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
10,000和50,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
名称:SacII限制性内切酶
货号:SV0653
规格:10KU|2KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
20,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
注意事项:
某些 Sacll的识别位点不能被切割,如 λDNA 右臂上的 Sacll 识别位点,有关底物位点优势效应详情请联系我们咨询 。
名称:微球菌核酸酶
货号:SV1069
规格:320000gel U
特性:
蛋白质制备中降解核酸
体外翻译
在非机械细胞裂解液制备时降低细胞裂解液的粘性
染色质结构分析
快速 RNA 测序
ChIP 分析
概述:
微球菌核酸酶来源于金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus),是一种非特异性的核酸内切酶和核酸外切酶。该酶从重组 E. coli 菌株纯化得到,可消化双链、单链、环化以及线性的核酸。在 pH 7.0-10.0 的范围内,微球菌核酸酶均有活性,无论对于 DNA 底物还是 RNA 底物,其最适 pH 值均为 9.2。微球菌核酸酶偏向于切割富含腺苷酸、脱氧腺苷酸或胸腺苷酸的底物。酶切 DNA 和 RNA 底物产生带有 3´ 磷酸的单核苷酸和二核苷酸。
来源:
重组 E. coli 菌株,含有微球菌核酸酶(GeneID:3238436)和麦芽糖结合蛋白(MBP)的融合基因。融合蛋白去除 MBP 并经纯化获得微球菌核酸酶。
反应条件:
1X 微球菌核酸酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl(pH 7.9 @ 25℃),5 mM CaCl2],加入 100 μg/ml BSA,37℃ 温育。
质保声明:
微球菌核酸酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们咨询。
单位定义:
(Kunitz 单位)1 单位指 37℃ 条件下,30 分钟内催化生成能在 260 nm 处增加 1 个 OD 值的酸溶性寡核苷酸所需的酶量。
(琼脂糖凝胶单位)1 单位指 37℃ 条件下,15 分钟内消化 1 μg Lambda 基因组 DNA,使低分子量 DNA 片段(100-400 bp)在 1.2% 的琼脂糖凝胶上消失所需的酶量。
注意:10,000 个琼脂糖凝胶单位约等于 1,000 个Kunitz 单位。
浓度:
2 X 106 gel units/ml。
注意事项:
微球菌核酸酶的活性需要 1-5 mM Ca2+。微球菌核酸酶的活性范围为 pH 7-10,盐离子浓度:低于 100 mM。加入过量 EGTA 可使酶失活。
名称:T4 RNA 连接酶 1(ssRNA 连接酶)
货号:SV1389
规格:5KU|1KU
特性:
连接单链 RNA 和 DNA
用 5´ -[32P] pCp 进行 RNA 3´ 末端标记
RNA 和 DNA 分子内及分子间的连接
合成单链寡脱氧核苷酸
蛋白质中掺入非天然氨基酸
概述:
催化 3´ →5´ 磷酸二酯键的形成,使核苷酸的 5´ -磷酸末端和 3´ -羟基末端连接,伴随着 ATP 水解为 AMP 和 PPi。作用底物包括单链 RNA、DNA 及二核苷焦磷酸。
来源:
携带 T4 RNA 连接酶 1 基因的 E. coli 菌株。
反应条件:
1X T4 RNA 连接酶缓冲液
[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃),10 mM MgCl2,1 mM DTT],加入 1 mM ATP,37℃ 温育。
热失活:65℃ 15 分钟或煮沸 2 分钟。
使用注意事项:
pCp 的连接需要加入终浓度为10%(v/v)的 DMSO。
随酶提供试剂:
10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
10 mM ATP(M0204)或 100 mM ATP(M0437)50% PEG 8000
质保声明:
无单链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 和磷酸酶污染。
单位定义:
1 单位指 37℃ 条件下,30 分钟内将 1 nmol 的 5´ -[32P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们咨询。
浓度:
10,000 或 30,000 units/ml。
名称:T5核酸外切酶
货号:MT0084
规格:1000U|10000U
T5核酸外切酶沿5"→3"方向降解DNA,它可降解双链DNA、单链DNA和缺刻的质粒DNA。它既能从5"-末端起始降解DNA,也能从线性或环状双链DNA的切刻或缺口处起始降解DNA,但不能降解超螺旋双链DNA。基于以上特性,T5核酸外切酶可应用于Gibson组装。
产品组成:
| 组分 | 规格 |
| T5 Exonuclease(10U/μl) | 100μl |
| 10×T5 Exo Buffer | 1ml |
保存条件:-20℃,可保存3年。
单位定义:1单位指在50μl反应体系,37℃条件下,30分钟内能从双链DNA底物上催化产生1nmol的酸可溶性脱氧核糖核苷酸所需要的酶量
使用注意事项:
1.1×T5 Exo Buffer:50mM KAc,20mM Tris-Ac pH 7.9,10mM Mg(Ac)2,1mM DTT。该酶在PCR Buffer中也具有活性。
2.该酶的最佳反应温度为37℃,在50℃也具有一定活性,因此可用于Gibson组装。
操作方法:
1.建立如下反应体系:
模板DNA————————1μg
10×T5 Exo Buffer———5μl
T5 Exonuclease————-1μl
ddH2O—————————up to 50μl
2.37℃,30分钟。
3.加入EDTA至总浓度为11mM,终止反应。
核酸酶选择指南:
| 货号 | 酶 | 消化活性 | 底物 | 产物 | 用途 |
| MT0068 | Benzonase核酸酶 | 核酸内切酶活性 | 任何形式的DNA/RNA | 3-5bp寡核苷酸 | 消化任何形式的核酸; 去除蛋白样品中的核酸污染。 |
| MT0084 | T5核酸外切酶 | 5"-3"核酸外切酶活性 | 单链和双链DNA | dNMP至6寡核聚体 | DNA消化和Gibson组装 |
| MT0085 | T7核酸外切酶 | 5"-3"核酸外切酶活性 | 双链DNA | ssDNA和二核苷酸 | 消化双链DNA |
| MT0086 | λ核酸外切酶 | 5"-3"核酸外切酶活性 | 单链和双链DNA | ssDNA和dNMP | 消化双链DNA |
| MT0087 | 核酸外切酶I | 3"-5"单链外切酶活性 | 单链DNA | dNMP、二核苷 | PCR扩增后降解消化引物 |
| MT0088 | 热敏双链DNA核酸酶) | 双链DNA核酸酶活性 | 双链DNA | 2-8bp寡核苷酸 | 去除RNA样品中的DNA污染。 |
| MT0089 | Rnase H | 核糖核酸内切酶活性 | 杂交到DNA链上的RNA | ssDNA和2-8bp的 5"磷酸寡核苷酸 |
除去杂交到poly(dT)上的mRNA poly(A); 在cDNA第二链合成时除去mRNA。 |
| MT0090 | Dnase I | 核酸内切酶活性 | 单链和双链DNA | 2-3bp寡核苷酸 | 蛋白样品中DNA的去除 |
| MT0091 | Rnase A | 核酸内切酶活性 | 单链RNA | 3"-核苷磷酸 | 质粒或基因组中RNA污染的去除 |
| MT0092 | DNA损伤修复酶 | 核酸外切酶活性 | DNA | DNA修复 |
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常见限制性内切酶识别序列(酶切位点)(BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI、XhoI等) 在分子克隆实验中,限制性内切酶是必不可少的工具酶。 无论是构建克隆载体还是表达载体,要根据载体选择合适的内切酶(当然,使用T载就不必考虑了)。先将引物设计好,然后添加酶切识别序列到引物5' 端。常用的内切酶比如BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI、XhoI等可能你都已经记住了它们的识别序列,不过为了保险起见,还是得查证一下。 下面是一些常用的II型内切酶的识别
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