·Protein G 磁珠 编号:SV1453 规格:1ml 特性: 少量纯化或 IgG 多个样本的免疫沉淀 无需离心 基质的再生不影响结合能力 概述: Protein A 和 Protein G 磁珠是一种能用于少量分离纯化免疫球蛋白的亲和介质。它们对来源于多种哺乳动物种属的 IgG 亚型具有较高亲和力,如:人、兔和小鼠。本品是将重组的截短型 Protein A 和 Protein G 共价耦联到一种无孔的顺磁颗粒上而形成的。截短型蛋白展示了对 IgG Fc 区更高的单位结合力和降低的非特异结合力。Protein A 和Protein G 对各种 IgG 的亲和性随物种不同和同种属 IgG 亚系不同而不同(见表)。 由于 Protein A 和 Protein G 与磁珠的耦联在较宽的 pH 范围内都是稳定且致密的,因此可以对来自腹水、血清或细胞培养上清物中的 IgG 进行磁免疫纯化,介质随后还可以进行再生而不影响结合容量。它们还可用于免疫沉淀法,用所选一抗将目的蛋白从细胞粗提液中沉淀。此外,利用 Protein A 或 Protein G 磁珠还能制成可重复使用的免疫共沉淀磁珠。特定的抗体通过化学键交联到被 Protein A 或 Protein G 包被的磁珠表面,形成一个可重复使用的免疫共沉淀磁珠,避免了抗体与目的抗原共同洗脱。 支持介质: 2 μm 无孔超顺磁微粒。 结合能力: 1 ml Protein A 或 Protein G 磁珠结合 > 400 μg 人 IgG。
·T3 DNA 连接酶 编号:SV1030 英文名称:Cac8I Restriction Endonuclease 规格:750KU|100KU 特性: 连接粘性末端或平末端 高盐耐受力 dsDNA 切刻修复 概述: T3 DNA 连接酶来源于 T3 噬菌体,是 ATP 依赖型双链 DNA 连接酶,可以有效催化粘性末端、平齐末端和切刻的连接。加入 PEG 6000 可提高平齐末端连接效率。T3 DNA 连接酶在反应中对 NaCl 的耐受性是 T4 DNA 连接酶的 2 倍,因此,当体外分子生物学实验中需要考虑实验离子浓度下 DNA 连接酶活性时,就多了一个选择。 来源: 重组 E. coli 质粒,含有 T3 DNA 连接酶编码基因。 反应条件: 1X T3 DNA 连接酶反应缓冲液 [66 mM Tris-HCl,1 mM ATP,10 mM MgCl2,1 mM DTT,7.5% PEG 6000(pH 7.6 @ 25℃)],25℃ 温育。 质保声明: T3 DNA 连接酶经过严格的质量控制检测,以确保最高的纯度和反应效率。详情请联*(代"系")我们咨询。 单位定义: 1 单位是指在 20 μl 总反应体系中,1X T3 DNA 连接酶反应缓冲液条件下,25℃ 温育 1 分钟,能使 50% 的 100 ng 经 HindIII 消化的 λDNA 连接所需的酶量。 浓度: 3,000,000 units/ml。 注意事项: ATP 是必需的辅因子。 当某些实验不能用 PEG 6000 时,可使用 T4 DNA 连接酶缓冲液,但活性会降低 10 倍。切记反应时体系内一定要有终浓度为 1 mM 的 ATP。需要维持高 NaCl 浓度的实验,建议使用不含 PEG 6000 的缓冲液。 65℃ 加热 10 分钟可使 T3 DNA 连接酶失活。如果反应缓冲液中含有 PEG,该酶不能加热失活,否则会抑制后续转化实验。