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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温,避光
- 保质期:
3年
- 英文名:
2×YT Medium
- 库存:
10
- 供应商:
上海瑞楚生物科技有限公司
- 规格:
250g/瓶
用途:用于重组大肠杆菌菌株的培养;
培养基配方( /L)
Pancreatic Digest of Casein (胰酶水解酪蛋白) 16.0g
Yeast Extract(酵母浸粉) 10.0g
Sodium Chloride(氯化钠) 5.0g
pH7.0±0.2(25℃)
使用说明
称取本品31.0克于1L蒸馏水或去离子水中(可按比例增加或减少配制量),加热煮沸至完全溶解,分装,121℃高压灭菌15分钟,冷却,备用。
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文献和实验1从微量培养基平皿中挑取单个菌落,接种于5ml 2×YT培养基(17g蛋白胨,10g Bactoyeast,5g NaCl,加水至1 000ml)中,37℃振荡培养过夜。 2取上述过夜菌1∶100稀释接种入500ml新鲜的2×YT培养液中,37℃振荡培养至OD=05~07,约25~3h。 3将上述带有菌液的三角瓶置冰浴15~30min
。对低拷贝数质粒,提取时可加大菌体用量并加倍使用溶液P1、P2 和 P3,可以有助于增加质粒提取量和提高质粒质量。 13. 溶液使用不当: 溶液 P2、P3 在温度较低时可能出现浑浊,应置于 37℃ 保温片刻直至溶解为清亮的溶液,才能使用。 14. 吸附柱过载: 不同产品中吸附柱吸附能力不同,如果需要提取的质粒量很大,请分多次提取。若用富集培养基,例如 TB 或 2×YT,菌液体积必须减少;若质粒是非常高的拷贝数或宿主菌具有很高的生长率,则需减少 LB 培养液体积。 15. 质粒未全部溶解
一、材料与试剂 1. SOBor2xYT2. MES3. 足够80个管子的TFB(50 mL)/400转化DMSO4. 5 M NaCl 二、仪器 1. 离心机 三、步骤 1. 室温下在5 ml SOB或2×YT中接种菌并且培养过夜。2. 加过夜培养的菌到500 ml 的SOB或2×YT,其装在4L瓶中以最大限度的透气。加入36 ml 5 M 的NaCl,在30℃下培养。3. 大约3 h,OD600达到0.5。4. 离心细胞。取沉淀,吸取
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