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- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃&-80℃
- 保质期：
3个月~12个月
- 英文名：
pSP73质粒
- 库存：
41
- 供应商：
上海禾午生物科技有限公司
- 规格：
2ug冻干粉&300ul甘油菌
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文献和实验cRNA 探针 cRNA探针是以eDNA为模板在体外转录而成的探针，可方便地通过已克隆于特定质粒载体的，DNA产生。这些质粒通常在紧邻多克隆位点的位置含有一个噬菌体启动子。应用相关的RNA聚合酶和4种核糖核苷(rNTPs)(其中至少一种带有标记物)进行体外转录反应，依赖DNA的RNA聚合酶以克隆的cDNA为模板，以含有标记物的三磷酸核糖核苷为原料，从启动子下游开始在体外转录产生RNA。通过改变外源cDNA在质粒中的插入方向或选用不同的RNA聚合酶，可以控制RNA的转录
突变和化学修饰的耐受性，认为siRNA的5’端相对于3’端具有对突变的较高耐受性。有学者认为正义链3’突出端的任何碱基修饰对siRNA作用效果均无明显影响。还有学者认为与反义链互补的正义链3’端发生1—4个碱基的错配反而有助于增强RNAI的活性。二、siRNA制备方法目前为止较为常用的5种制备siRNAs的方法包括化学合成体外转录长片断dsRNAs经RNase III 类降解 (e.g. Dicer, E. coli, RNase III)siRNA表达载体或者病毒载体在细胞中表达siRNAsPCR制备
，结果只是dsRNA两端多了启动子的序列。我们也可以将片段克隆到带2个反向相同RNA聚合酶启动子之间的载体上达到同样的目的。体外转录试剂选择的要点就是产量，速度；由于要避免dsRNA部分序列和其他基因重叠，避免非目标基因的沉默或者脱靶，通常不会选择太长的片断作为dsRNA的模板，因此对试剂盒合成dsRNA的长度，倒是不一定要求太高。 1. 号称RNA公司的Ambion是最早推广RNAi试剂的厂家之一，去年初被生命科学领域的巨头ABI以2.73亿美金高价收购其RNA部门而震动业界
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