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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃&-80℃
- 保质期：
3个月~12个月
- 英文名：
pUCGM质粒
- 库存：
41
- 供应商：
上海禾午生物科技有限公司
- 规格：
2ug冻干粉&300ul甘油菌
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文献和实验【求助】将报告基因质粒转染到癌细胞中，是否都要共转染一个带有抗性基因的质粒来筛选阳性克隆？
lsdcfhyj 将报告基因质粒转染到癌细胞中，是否都要共转染一个带有抗性基因的质粒来筛选阳性克隆？ 很多文献是这样做的，可是我认为报告基因质粒本身就带有抗生素标记基因，为什么还要共转染另一个抗性质粒？一直对着个问题很困惑，请懂这方面知识的前辈指点指点？还有就是质粒使用量的问题，我不清楚到底质粒用量与转染细胞之间到底是个什么样的比例合适，看了很多操作步骤，有的一个六孔板一孔就要用1到2微克，可是商家产品就有1微克包装的，这样的话，那用量未免
1、质粒的概念 质粒（Plasmid）是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子，能够独立于宿主染色体进行自我复制，并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因（如抗生素抗性基因）。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型，如用于保存序列信息的克隆质粒（如：pUC 系列质粒），用于表达蛋白的质粒（如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒），用于基因编辑的质粒（如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A
体长4362 bp，它有一个来自大肠杆菌中高拷贝天然质粒的复制起点(ori)，这个复制起点可使pBR322在大肠杆菌中的拷贝数达到20个，因而pBR322载体的DNA很容易从大肠杆菌中提取出来。这是pBR322中的第一个结构特征。 图1 大肠杆菌克隆载体pBR322的物理图谱 此载体中有两个标记基因，一个是氨苄青霉素抗性基因（Apr），另一个是四环素抗性基因（Tcr）。氨苄青霉素和四环素都是人类治疗疾病的抗生素药物。当把pBR322 DNA转化大肠杆菌细胞，其中部分细胞就被该载体
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