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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃&-80℃
- 保质期:
3个月~12个月
- 英文名:
pSD1211-U6-shRNA质粒
- 库存:
41
- 供应商:
上海禾午生物科技有限公司
- 规格:
2ug冻干粉&300ul甘油菌
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文献和实验RNAi分析 ·更清晰的结果―避免非特异应激反应·更高的特异性―仅仅靶定目的基因·更大的稳定性―在血清中不会快速降解 BLOCK-iT™ U6 RNAi Entry Vector 在大部分哺乳动物细胞中瞬时siRNA表达 ·简单、快速地克隆shRNA序列-方便地筛选多个基因或者序列·成本低廉-使用两个ssDNA oligo·很容易转移U6框到其它载体-att
shRNA表达质粒多采用RNA聚合酶III启动子,如人源H1或鼠源U6启动子,pol III在哺乳动物细胞(绵羊是哺乳动物)内引导非编码小RNA的转录,转录产物无poly(A)尾,且在转录过程中遇到连续4-5个U时转录终止。此载体最后转录出的产物是经折叠形成的发夹状小RNA(shRNA); shRNA 在细胞内被Dicer酶切割成3’端带有两个U突出的siRNA,进而启动RNAi,介导基因沉默。载体中的间隔序列为9个核苷酸时最为有效。 是可行的! 高成胡君
polIII型启动子和终止子序列,RNAi靶序列克隆进入后将在哺乳动物细胞中形成shRNA。目的载体(destinationvector)Gateway®适合的目的载体(DEST)包含attR位点,可以与入门克隆进行重组,构建表达载体。BLOCK-iT™RNAi慢病毒和腺病毒DEST载体接受来自U6入门载体的RNAi框。此外,也有在原核、酵母、昆虫或者哺乳动物系统表达天然蛋白或者融合蛋白的DEST载体可供选择。LRClonase™便于attL和attR位点在LxRGateway®重组反应中进行重组的一种酶
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