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- 2025年07月16日
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普信质谱组学服务
Label-free技术即非标记定量蛋白质组分析技术，是通过液质联用技术对蛋白质酶解肽段进行质谱分析，无需使用昂贵的稳定同位素标签做标记，只需分析大规模鉴定蛋白质时所产生的质谱数据，比较不同样本中相应肽段的信号强度，从而肽段对应的蛋白质进行相对定量。
技术原理
每条肽段的丰度（量）与其在MS1中的峰面积或信号强度成正比；而不同样本的同一条肽段在色谱上的保留时间是一致的，因此，可通过对比MS图谱，再整合到相应蛋白，实现对蛋白质在不同样本中的相对表达水平的定量分析。
实验流程
提取样本中的总蛋白，取出一部分做蛋白浓度测定及SDS-PAGE检测，另取部分进行胰蛋白酶酶解，对酶解肽段除盐后，对样本进行质谱分析及数据分析，如图所示
技术特点
1、无需标记，操作简单；
2、不受比较样品数限制；
3、对实验操作稳定性、重复性要求高，要求至少做三次技术重复或生物重复；
4、准确性较标记定量差。
应用领域
1、适合大样本量的定量比较
2、对无法用标记定量实现的实验设计，易用label-free技术
3、要求物种具有蛋白质参考数据库、EST序列（转录组）或基因组注释信息
以上内容最终解释权归苏州普信生物医药科技有限公司所有
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文献和实验相关实验
本节课程介绍了label-free定量蛋白质组学技术的原理及应用。主要包括：（1）以MS数据为例，系统介绍label-free技术进行蛋白质定量的技术流程和原理。（2）介绍免费的label-free分析套件—Maxquant和Perseus。（3）以免疫沉淀（IP）数据为例，展示label-free进行蛋白质互作定量的应用。（4）以数据为例，展示label-free在外泌体蛋白定量分析中的应用。
行串联质谱分析，可同时比较4种或8种不同样品中蛋白质的相对含量或绝对含量。 iTRAQ技术特点： 不同样本标记之后混样，统一处理上机，减少了分别上机造成的实验误差，并利用同位素标签的丰度来检测，定量更准确，重复性更好； 由于需要标记试剂标记，因此成本相对较高； 通量高，在一次实验中最多可同时比较8个样品； 利用基于同一个参考样品的办法，可以进行多于8个样品的定量比较； iTRAQ的覆盖度高、灵敏度高。 Label-Free定量蛋白质组学分析 Label-Free定量，即非标记的定量蛋白质组学
备注： （1）普通 label free 要求量参考 DIA 2.0/ 4D-DIA/PRM； （2）细胞、组织、FFPE 石蜡样本低于最低送样量，可选择超微量提取方法。根据样本数，可选择在 Labonline 录制超微量 4D/480 Label free 或超微量 DIA 2.0 方案。
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
蛋白质组学 Label-Free
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