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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 库存:
36
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
详见说明书
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 英文名:
人肝癌细胞;HepG2[HepG2]
- 规格:
株
细胞名称 人肝癌细胞;HepG2[HepG2]说明书
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞来源于一名15岁的白人少年的肝癌组织。该细胞表达甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-1-抗胰蛋白酶、转铁蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、纤溶酶原、补体C4、C3激活物、纤维蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、视黄醇结合蛋白;表达胰岛素受体和胰岛素样生长因子IGFⅡ的受体;该细胞具有3-羟基-3-甲酰辅酶A还原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。目前尚未证明该细胞中有HBV基因组。
培养条件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:
3传代,2-3天传一代
传代情况 C76
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
人肝癌细胞;HepG2[HepG2]说明书实验要点及说明
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
人肝癌细胞;HepG2[HepG2]说明书冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
人 PGRL / IGSF8 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人 CANX / Calnexin 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 Epcr / PROCR 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 IL2RG / CD132 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人 Endoglin / CD105 / ENG 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人 JAM-A / F11R ELISA配对抗体
重组甲型流感 H3N2 神经氨酸酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性)
人 GADD45GIP1 基因全长ORF克隆
重组小鼠 FAM3D / Oit1 蛋白 (Fc 标签)
人 CKS2 基因全长ORF克隆
人 GSR 基因全长ORF克隆
人 TPD52L1 基因全长ORF克隆
人肝癌细胞;HepG2[HepG2]说明书LDN57444LDN57444
洛霉素A1Bafilomycin A1
XL 019 (1 mg)(2S)-N-[4-[2-[[4-(4-morpholinyl)phenyl]amino]-4-pyrimidinyl]phenyl]-2-pyrrolidinecarboxamide
DiaEasy Dialyzer (10 ml) MWCO 12-14 kDaDiaEasy Dialyzer (10 ml) MWCO 12-14 kDa
pGB Hsp90 siRNA Vector MixpGB Hsp90 siRNA Vector Mix
Yeast Protein Extraction ReagentEZLys Yeast Protein Extraction Reagent
Benzyloxycarbonyl-Phe-Ala-Fluoromethylketone; Z-Phe-Ala fluoromethyl ketone; Z-Phe-Ala-FMKZ-FA-FMK
Cathepsin G Inhibitor I (5 mg)P-
Prostaglandin E2-d4 Lipid Maps MS Standard (5 mg)Dinoprostone-d4|PGE2-d4, Prostaglandin E2-d4 Lipid Maps MS Standard, 9-oxo-11α 15S-dihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic-3,3,4,4-d4 acid
5,6,7,8-tetrahydro-2-Naphthoic Acid (10 g)NSC 131342, 5,6,7,8-tetrahydro-2-Naphthoic Acid, 5,6,7,8-tetrahydro-2-naphthalenecarboxylic acid
人肝癌细胞;HepG2[HepG2]说明书培养操作步骤
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
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文献和实验大多数朋友说推荐培养液为DMEM加10%胎牛血清,1%谷氨酰胺,我们这里用1640加10%新生牛血清,效果也不错。DMEM不容易观察,有时候等DMEM黄了的时候,细胞已经严重缺乏养料,1640颜色变化比较明显,也比较符合细胞当时的情况。细胞置于5%CO2、37度培养,细胞生长较快,根据你留在瓶里细胞的数量,50%两天后传代一次。0.25%胰酶+0.01%EDTA消化,该细胞容易抱团,我是一般先用胰酶洗一下,然后加胰酶37度,观察细胞形态变化,细胞变圆时,倒掉胰酶,加入培养液,吹打重悬
要去除内毒素,plasmid:lipo约为1:0.5-1:5。实际上采用说明书的推荐量就很好,1:2.5 4,用前自己好好看一遍说明书,哈哈 yangea认为: HepG2细胞的确相对于CHO等细胞而言转染效率比较低,但也只是相对。据我们实验室的经验,用lipofectamine 2000转染HepG2完全没有问题,无论是瞬时转染还是稳定转染,也无论是转一个质粒还是共转染两个质粒(转两个以上没有试过)。但有些问题需要注意一下:
担心。不需要用电转,磷酸钙法也可以有40-50%的操作上主要注意:1,细胞铺板时的状态很重要,应该在铺板前尽量消化为单细胞悬液,trypsin+EDTA充分吹打即可2,转染前1天铺板,待转染时密度刚好达到80-90%,不能太低,但是也不能长过(细胞成团,堆积)。最好是刚刚长满,此时还在对数生长期3,加入的质粒要去除内毒素,plasmid:lipo约为1:0.5-1:5。实际上采用说明书的推荐量就很好,1:2.54,用前自己好好看一遍说明书,哈哈丁香园网友yangea认为:HepG2细胞的确相
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