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江西江蓝纯生物试剂有限公司
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产品简介:
含铁血黄素(Hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素,为金或棕颗粒,因其含铁,且为金,故称为含铁血黄素。当红细胞被巨噬细胞吞噬后,在溶酶体酶的作用下,血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。Perls普鲁士蓝反应(Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色,即经过亚化钾和稀酸处理后可以产生蓝色,常见于吞噬细胞或间质内,其染色原理在于亚铁溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来,三价铁与亚铁反应,生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁。
普鲁士蓝染色用于显示局部组织内的各种出血性病变,常见于吞噬细胞内,可以很地区分含铁血黄素与其他色素。该染色液稳定性、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广,可以进行复染,该染色液的复染液采用中性红。
普鲁士蓝染色液(中性红法)
注意事项:
1、 切片脱蜡应尽量干净。组织固定常采用10%中性福尔马林,经普通福尔马林长期固定后,组织会有损伤。避免使用酸性固定剂,铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。
2、 整个操作过程中容器要干净,避免用金属铁制品,洗切片和容器时以蒸馏水为宜,因普通水内含铁质。Perls stain染色时,应根据样本情况调整着色时间。
3、 所有切片都应使用同一个阳性对照切片,选择适合的对照非常重要。尸检肺组织是一个很的对照,包含相当数量的铁阳性巨噬细胞(心衰细胞)。
4、 冰冻切片和细胞染色,根据具体情况摸索实验条件。
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文献和实验成份:蛋白胨琼脂PH7.2-7.4 5000毫升 胆 盐 2.5克 乳糖 5.0克 对氨基苯甲酸 25毫克 1%中性红溶液 25毫升 制法: 将胆盐,对氨基苯甲酸,乳糖趁热加入已灭菌之蛋白胨琼脂中,待冷至50-60℃时,加入1%中性红液2.5毫升,混合后即倾注平皿,凝固待用. *:1%中性红:1克中性红加酒精60毫升,加水40毫升
附录I 染色液的配制 一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液 (实验6,53) A液:美蓝(methylene blue) 0.6g 95%酒精 30ml B液:KOH 0.01g 蒸馏水 100ml 分别配制A液和B液,配好后混合即可。 二、齐氏 (Ziehl)石炭酸复红染色液 (实验6) A液:碱性复红(basic
四、醋酸洋红染液 将洋红粉末1g倒入100mL45%醋酸溶液中,边煮边搅拌,煮沸(沸腾时间不超过30s),冷却后过滤,即可使用。也可再加入1%~2%铁明矾水溶液5-10滴,至此液变为暗红色而不发生沉淀为止。如制作永久标本染色时,可加入饱和氢氧化铁或醋酸铁(媒染剂)溶液数滴,至染色液呈浅蓝色为止。 五、硫堇染液(工作液) ①干液(硫堇):硫堇1g或2g溶于100mL 50%乙醇中,溶解后过滤备用; ②醋酸钠缓冲液:醋酸钠・3H2O 9.7g,巴比
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