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江西江蓝纯生物试剂有限公司
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产品简介:
含铁血黄素(Hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素,为金或棕颗粒,因其含铁,且为金,故称为含铁血黄素。当红细胞被巨噬细胞吞噬后,在溶酶体酶的作用下,血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。Perls普鲁士蓝反应(Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色,即经过亚铁和稀酸处理后可以产生蓝色,常见于吞噬细胞或间质内,其染色原理在于亚铁溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来,三价铁与亚铁反应,生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁。
普鲁士蓝染色用于显示局部组织内的各种出血性病变,常见于吞噬细胞内,可以很地区分含铁血黄素与其他色素。该染色液稳定性、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广,可以进行复染,该染色液的复染液采用伊红。
普鲁士蓝染色液(伊红法)
注意事项:
1、 切片脱蜡应尽量干净。组织固定常采用10%中性福尔马林,经普通福尔马林长期固定后,组织会有损伤。避免使用酸性固定剂,铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。
2、 整个操作过程中容器要干净,避免用金属铁制品,洗切片和容器时以蒸馏水为宜,因普通水内含铁质。Perls stain染色时,应根据样本情况调整着色时间。
3、 所有切片都应使用同一个阳性对照切片,选择适合的对照非常重要。尸检肺组织是一个很的对照,包含相当数量的铁阳性巨噬细胞(心衰细胞)。
4、 冰冻切片和细胞染色,根据具体情况摸索实验条件。
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文献和实验成分 蛋白胨 10g 乳糖 10g 磷酸氢二钾 2g 琼脂 17g 2%伊红Y溶液 20mL 0.65%美蓝溶液 10mL 蒸馏水 1000mL pH7.1 制法 将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正PH,分装于烧瓶内,121℃
染液制备: 1.苏木精染液(1)称取0.5g苏木精、5.0g铵矾或钾矾和0.1g碘酸钠加温溶于70ml蒸馏水中;(2)加入30ml甘油和2ml冰乙酸充分混匀后过滤即成母液;(3)母液可长期保存。用蒸馏水以1:20稀释母液即成工作液。工作液也较长时间储存,但每次染色前宜过滤,去除氧化膜; 2.伊红染液伊红有醇溶性与水溶性之分。将0.5g伊红溶于100ml70%乙醇或蒸馏水即成工作液; 染色步骤:1.用37℃的温BSS漂洗3次,每次20s-1min;2.用中性
附录I 染色液的配制 一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液 (实验6,53) A液:美蓝(methylene blue) 0.6g 95%酒精 30ml B液:KOH 0.01g 蒸馏水 100ml 分别配制A液和B液,配好后混合即可。 二、齐氏 (Ziehl)石炭酸复红染色液 (实验6) A液:碱性复红(basic
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