细胞线粒体分离试剂盒

细胞线粒体分离试剂盒(Cell Mitochondria Isolation Kit)是快速便捷分离培养细胞中的线粒体的试剂盒，分离线粒体的同时可以获得去除线粒体的细胞浆蛋白，可用于分析细胞色素C等线粒体蛋白向胞浆的释放，大部分获得的线粒体都含有完整的内膜和外膜，并具有线粒体的生理功能(如检测线粒体膜电位)，获得的蛋白可用于SDS-PAGE、Western、双向电泳等蛋白分析。本试剂盒提供台盼蓝染色液和PMSF，可以分别判断线粒体质量和提取细胞浆蛋白。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

线粒体是细胞呼吸的主要场所，细胞活动所需的能量主要由在线粒体内进行的氧化所产生的能量来供应。制备线粒体的关键是保持线粒体的完整性和纯度，可通过分级分离法获得，即先低俗出去细胞核以及细胞碎片，再进行高速梯度离心分离线粒体。

自备材料：
胰蛋白酶
低温离心机、匀浆器
PBS

注意事项：
试剂(如台盼蓝染色液)对于不同实验不必全部使用，在实验条件成熟后可以不必使用。
如果不是用于制备线粒体蛋白，Mitochondria Lysis buffer和Wash buffer中不必加入PMSF。如果用于制备线粒体蛋白样品，Mitochondria Lysis buffer和Wash buffer中需添加PMSF。PMSF一定要在试剂加入到样品中前1～2min内加入，以免PMSF在水溶液中很快失效。
分离线粒体的所有步骤均需在冰上或4℃进行，所用溶液需冰浴或4℃预冷，全部操作时间尽量控制在1h以内。
通常在分离线粒体时前后两次离心速度选取1000g和15000g，如果希望纯度更高，但对线粒体的得率要求不高，前后两次离心速度可用2000g和6000g。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。