- ￥200 - 340
- 晶抗生物
- JK3062
- 进口/国产
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
6个月
- 供应商：
上海晶抗生物工程有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
100T/200T
| 规格： | 100T | 产品价格： | ￥200.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 200T | 产品价格： | ￥340.0 |
外源基因导入真核细胞的方法有很多种，如磷酸钙转染法、DEAE-葡聚糖(Dextran)转染法、脂质体法、电穿孔法、显微注射法等。DEAE-葡聚糖转染法的原理是带正电荷的DEAE-葡聚糖与带负电的核酸的磷酸骨架相互作用，形成复合物，该复合物通过细胞内吞噬作用使DNA转导进入细胞核。
自备材料：
胰蛋白酶消化液
完全培养基
PBS、无菌水
注意事项：
注意无菌操作，尽量避免污染，同时DNA不应含有蛋白和酚。
休克处理某些细胞系会使转染效率大大提高，但应注意甘油暴露过久易导致细胞死亡。
转染12～24h后，可以加入终浓度为10mmol/L的钠溶液，可以提高病毒滴度。
如果转染效率低下，有可能是过多细胞死亡所致，应考虑减少DEAE-Dextran的用量或作用时间，或者减少氯喹作用时间。
支原体污染细胞，易导致转染不稳定。
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文献和实验就是HEK293细胞系)。更高的转染效率是更高的病毒滴度的基本保障。 ViraPackTM 转染 试剂盒经Stratagene非常著名的MBS哺乳动物转染试剂盒改进而来，使用起来更为方便，推荐用于AdEasy® XL腺病毒载体系统，AAV(腺相关病毒)-无辅毒系统以及ViraPortTM反转录病毒系统，也可用于慢病毒载体。 ViraPackTM 病毒转染 试剂盒：货号#200488 试剂盒提供：2.5 M CaCl2, Solution，2x BBS (pH
基因转染是将具生物功能的核酸（RNA或DNA）转移或运送到细胞内，并使核酸在细胞内维持其生物功能的核酸转移技术。转染技术的目的是主要是研究真核基因的表达和调控，目前的方法包括磷酸钙共沉淀法，电穿孔法以及同DEAE-dextran或阳离子脂质体试剂形成复合物法。 在这些不同的方法中，DNA转导的效率，转导的机制，可重复性及使用的方便性都存在差异。而且，有效的DNA转导会伴随某些毒性或细胞抑制，其程度依赖于试剂、步骤和目的细胞的不同而不同，因此建议根据实际条件和实验条件，选择最佳
CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 293FT 细胞转染验证 and trouble shooting
前期记录CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 确定目标基因CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 目标基因背景调查CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- sgRNA 及引物设计CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 构建 sgRNA+Cas9 载体golden gate 构建好载体，酶切验证成功293FT 细胞转染验证1. sgRNA+pSpCas9 载体用 lipofectamine 3000 转染至 293FT 细胞（按照转染试剂的说明书走），确保转染效率> 70
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