DEAE-Dextran细胞转染试剂盒

DEAE-Dextran细胞转染试剂盒(DEAE-Dextran Cell Transfection Kit)适用于瞬时转染(transient tranfection)，不宜用于筛选稳定表达细胞株，这是因为DEAE-dextran在较高浓度作用较长时间会对细胞产生一定毒性。氯喹的加入可以抑制溶酶体对外源DNA的降解，从而提高转染效率。但对于具体的细胞、具体的培养条件，如需获得更加理想的转染效率，须自行摸索上述各种转染方法，找出优化的转染方法。CHO、DUKX、BⅡ等细胞也可以通过甘油、DMSO进行热休克处理以提高转染效率。

外源基因导入真核细胞的方法有很多种，如磷酸钙转染法、DEAE-葡聚糖(Dextran)转染法、脂质体法、电穿孔法、显微注射法等。DEAE-葡聚糖转染法的原理是带正电荷的DEAE-葡聚糖与带负电的核酸的磷酸骨架相互作用，形成复合物，该复合物通过细胞内吞噬作用使DNA转导进入细胞核。

自备材料：
胰蛋白酶消化液
完全培养基
PBS、无菌水
 
注意事项：
注意无菌操作，尽量避免污染，同时DNA不应含有蛋白和酚。
休克处理某些细胞系会使转染效率大大提高，但应注意甘油暴露过久易导致细胞死亡。
转染12～24h后，可以加入终浓度为10mmol/L的钠溶液，可以提高病毒滴度。
如果转染效率低下，有可能是过多细胞死亡所致，应考虑减少DEAE-Dextran的用量或作用时间，或者减少氯喹作用时间。
支原体污染细胞，易导致转染不稳定。