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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
6个月
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 保存条件:
4℃ 避光
- 规格:
500ml
乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)能把乳酸氧化为酸,该酶存在于能进行糖酵解的细胞中,在细胞受伤死亡时酶被释放出来。LDH有五种同工酶,LDH1~5分别存在于不同组织中。含此酶活性高的组织为肝脏、骨骼肌,其正常红细胞的LDH活性比血清高约100倍。LDH1为H型(心型),与氧代谢有关;LDH5为M型(肌型),与厌氧代谢有关。
自备材料:
1、 蒸馏水
2、 恒温箱或水浴锅
操作步骤(仅供参考):
冰冻切片,厚6μm,无需固定。
切片人LDH孵育液中,置于37℃温箱,浸染约5~30min。
蒸馏水冲洗。
甘油明胶封固。
阴性对照(可选):
相同切片入LDH对照液中,置于37℃温箱,浸染约5~30min,作为对照。其余步骤同正常步骤,结果为阴性。
注意事项:
本染色液适用于冰冻切片。
对冰冻切片染色时,应减少切片在室温暴露的时间。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验外周血DNA为模板,PCR扩增凝血因子FⅧ基因的583bp特异片段产物,其中包含MspⅠRFLP多态位点,经MspⅠ酶切后,琼脂糖凝胶电泳检测等位片段的长度(583 bp或360 bp+223 bp),以此为遗传标记进行连锁分析,判断胎儿是否得到了带有缺陷FⅧ基因的染色体,从而做出间接基因诊断。 二、材料及试剂 1. DNA(50ng/μl)、引物Ⅰ和Ⅱ(20 μΜ)、TaqDNA聚合酶(5 U/μl)10×PCR反应缓冲液、 dNTP(2.5 mM)、灭菌蒸馏水、液体石蜡、限制性内切酶MspⅠ
酶 5. 琼脂糖 6. DNA Marker 7. tip 8.eppendorf管 9. 微量移液器 附试剂的配制: 1. 10×PCR缓冲液 500mmol/L KCl 100mmol/L Tris·HCl(Ph8.3,室温) 15mmol/L MgCl2 0.1% 明胶 2. 4×dNTP 10mmol/L dATP 10mmol/L dCTP
限制性内切酶的作用特点以及使用方法。掌握 DNA 琼脂糖凝胶电泳的操作与 DNA 片段的回收。【实验原理】目的 DNA 被限制性核酸内切酶水解后产生大小不同的 DNA 片段,这些 DNA 片段在一定浓度的琼脂糖凝胶电泳上可以按分子大小不同而分开,并可以用不同的方法再把这些 DNA 片段从琼脂糖凝胶上回收回来。限制性核酸内切酶水解 DNA 的活性与酶的单位数,缓冲液的离子强度和反应温度有关。【实验试剂与器材】限制性内切酶10×内切酶缓冲液琼脂糖(一)DNA 分子的酶切消化【实验方法与步骤】DNA
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