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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 细胞类型:
科研
- 品系:
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- 组织来源:
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- 物种来源:
鼠/人/其它
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
- 器官来源:
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- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 年限:
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- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 英文名:
P388D1
P388D1(淋巴瘤细胞) 带证书细胞简介
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二、细胞收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml完全培养液,悬浮细胞需离心处理,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。
三、细胞培养步骤
- 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中,加入约6ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,进行离心收集,1000RPM条件下离心5分钟,去除上清,按冻存数量加入血清及DMSO,冻存比例为90%FBS+10%DMSO。
注意:
我细胞库认为购买细胞的客户有培养细胞的经验,客户收到细胞后,严格按照本细胞培养条件更换完全培养基。如果因为客户缺少基本的细胞培养知识或培养条件而导致细胞各类问题,我库概不负责。对于因缺少细胞培养知识和时间,建议客户可联系我细胞库代为培养细胞和后续相关实验。
| Hs 578Bst(乳腺细胞) |
| NK-92(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞) |
| NK-92MI(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞) |
| HMy2.CIR(人B 淋巴母细胞) |
| OK(负鼠(opossum)肾细胞) |
| FO(骨髓瘤细胞) |
| RAW 264.7(单核巨噬细胞白血病) |
| P19(畸胎癌细胞) |
| C6(胶质瘤细胞) |
| RBL-2H3(白血病细胞) |
| SiHa(子宫颈癌细胞) |
| MG-63(骨肉瘤细胞) |
| HEC-1-B(子宫内膜腺癌细胞) |
| P388D1(淋巴瘤细胞) 带证书 |
| ES-2(卵巢透明细胞癌细胞) |
| Saos-2(成骨肉瘤细胞) |
| MDA-MB-468(乳腺癌细胞) |
| SK-MES-1(肺鳞癌细胞) |
| MDA-MB-435S(乳腺癌细胞) |
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文献和实验microRNA-195通过直接影响靶基因Cyclin D1和Cyclin E1的表达 抑制了人神经胶质瘤细胞的增殖
膜母细胞瘤(pRb)和增殖细胞核抗原(PCNA)的形成。相反,抑制了miR-195的作用后,神经胶质瘤细胞的增殖速度加快,S期细胞的比例升高,G1/G0期的细胞数减少,提高细胞的非依赖型锚定生长能力,促进细胞中pRb和PCNA的磷酸化。此外,我们还发现miR-195通过直接作用于Cyclin D1和Cyclin E1的mRNA 3’UTR区下调Cyclin D1’和Cyclin E1的表达,抑制了神经胶质瘤细胞的增殖。综上所述,该实验结果表明miR-195在抑制神经胶质瘤细胞增殖的过程中发挥了重要的作用,并阐明
。 4) 将尼龙毛摊在铺有纱布的方盘内,37℃温箱干燥2~3天后,贮藏在带盖的方盘内。 2. 装尼龙毛柱 1) 取50ml玻璃注射器,拔去注射芯,在注射器头上套一段带夹子的胶管。 2) 将尼龙毛梳理,并适当折叠,以适应注射器的直径,填入注射器内,约20ml的体积。 3) 将填好尼龙毛的注射器连同注射器芯一起包好,高压灭菌。 3. 细胞分离 1) 将注射器固定在支架上,倒入37℃的细胞
Ⅰ型异型淋巴细胞 细胞中等大小,细胞多呈圆形或部分不规则形或阿米巴型,胞质嗜碱性强,呈深蓝色,含有大小不等的空泡或呈泡沫状,无颗粒或有少数颗粒,胞核偏位,呈椭圆形,肾形或分叶形,染色质粗糙,呈粗网状或成堆排列。正常血液不见、骨髓中偶见。 Ⅱ型异型淋巴细胞 细胞胞体较Ⅰ型大,形态不规则,胞质量多,呈浅灰蓝色,但靠胞膜边缘处较深染且不整齐,无空泡,可有少数天青胺蓝颗粒,胞核呈圆形、椭圆型或检验地.带网搜集
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