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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
116
- 英文名:
Deoxyribonuclease I
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
200U|1000U
特别提示:包括DNase I在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:DNase I
英文名称:Deoxyribonuclease I
产品货号:DNase I
产品规格:200U|1000U
本酶从牛胰腺纯化得到,是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶。DNase I水解单链或双链DNA后的产物,5"端为磷酸基团,3"端为羟基。DNase I活性依赖于钙离子,并能被镁离子或二价锰离子激活。镁离子存在条件下,DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点;二价锰离子存在条件下,DNase I可在同一位点剪切DNA双链,形成平末端,或1-2个核苷酸突出的粘末端。
特点:不含RNase(RNase free),可以用于各种RNA样品的处理。提供了用于DNase I失活所需的EDTA。
用途:制备不含DNA的RNA样品;RT-PCR反应前RNA样品中去除基因组DNA等可能的DNA污染;体外T7, T3, SP6等RNA Polymerases催化的RNA转录后去除DNA模板; DNase I footprinting研究DNA-蛋白质相互作用;缺口平移(nick
translatioin);产生DNA随机片段文库;细胞凋亡TUNEL检测中部分剪切基因组DNA作为阳性对照。
分子量:约32kDa(单体)。
活性定义:37℃10分钟内,将能够完全降解1μg pBR322质粒DNA所需的酶量定义为1个活性单位。
活性检测条件:40mM Tris-HCl(pH8.0),10mM MgSO4,1mM CaCl2,1μg of pBR322 DNA。
纯度:不含其它DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶。
酶储存溶液:50mM Tris-acetate(pH7.5),10mM CaCl2,50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(10X):100mM Tris-HCl(pH7.5 at 25℃),25mM MgCl2,1mM CaCl2。
失活或抑制:加入EDTA至终浓度为2.5mM后,65℃加热10分钟可使DNase I失活。酚氯*抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂,达到毫摩尔/升浓度的锌离子,0.1%的SDS,DTT、巯基乙醇等还原剂,50-100mM以上盐浓度均对DNase I有显著抑制作用。
产品组份:
DNase I,RNase-free(1U/μl)————200U
Reaction Buffer(10X)————————0.2ml
EDTA(25mM)—————————————0.2ml
储存条件:-20℃
除了DNase I,,我公司还供应以下相关产品:
名称:AlwNI限制性内切酶
货号:SV0043
规格:2500U|500U|250U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 50%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dcm甲基化敏感。
注意事项:
如下条件可能出现星号活性:低离子强度、高酶浓度、甘油浓度>5% 或 pH 值>8.0。
名称:ApoI限制性内切酶
货号:SV0055
规格:5KU|1KU|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1: 75%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 75%
特性:
重组酶、省时酶。
反应条件:
BalbBuffer 3.1,50℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
37℃ 时活性50%。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
该酶切割产生的 5´ AATT突出端,能与 EcoRl 消化的 DNA 片段连接。
名称:HindIII限制性内切酶
货号:SV0401
规格:50KU|50KU|10KU|10KU|5KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 50%
CutSmart Buffer: 50%
特性:
重组酶。
反应条件:
BalbBuffer 2.1,37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
20,000和100,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
延时酶切条件下可能出现星号活性。
名称:PmlI限制性内切酶
货号:SV0598
规格:10KU|2KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 100%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
20,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
名称:ScaI-HF限制性内切酶
货号:SV0679
规格:5KU|5KU|1KU|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 100%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
20,000和100,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
名称:XcmI限制性内切酶
货号:SV0774
规格:5KU|1KU|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
重组酶。
反应条件:
BalbBuffer 2.1,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
5,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
Xcml 产生的 DNA 片段包含有单碱基的3´突出端,比平末端更难连接。
延时酶切条件下可能出现星号活性。
名称:Therminator DNA 聚合酶
货号:SV0968
规格:1KU|200U|100U
特性:
提高了修饰核苷酸的掺入能力
部分核糖核酸置换法测定 DNA 序列
ddNTP 或 acyNTP 的链终止法用于测序或 SNP 分析
概述:
Therminator DNA 聚合酶是 9°N™ DNA 聚合酶中的一种,但有较强的掺入修饰底物的能力,如:ddNTP、rNTP 和 acyNTP。
来源:
来源:于 E. coli 菌株。此菌株含有从 Thermococcus species 9°N-7 中克隆的经过基因工程改造的 9°N (D141A/E143A/A485L) DNA 聚合酶基因。
浓度:
2,000 units/ml。
使用注意事项:
扩增延长区域(extended regions)时可能需要优化反应条件。
名称:APE 1
货号:SV1130
规格:5KU|1KU
特性:
单细胞凝胶电泳(彗星试验)
碱洗脱
碱解旋
改良切刻翻译
概述:
人源脱嘌呤/脱嘧啶(AP)核酸内切酶APE 1,也称为 HAP 1 或 Ref-1,与大肠杆菌外切酶 III 蛋白具有同源性。APE 1水解断裂脱嘌呤/脱嘧啶位点 5´ 端的磷酸二酯键,产生单链 DNA 断裂,留下 3´ 羟基和 5´ 脱氧核糖磷酸末端。除具有 AP 核酸内切酶活性外,据报道 APE1 还具有弱的 DNA 3´ 二酯酶、3´ 到 5´ 核酸外切酶和 RNase H 活性。
除 DNA 修复活性外,APE 1 还能体外调控许多转录因子的 DNA 结合活性。APE 1 已被证实能刺激 Fos-Jun 异源二聚体、Jun-Jun 同源二聚体、Hela 细胞 AP-1 蛋白以及包括 NF-kB、Myb 和 ATF/CREB 家族成员在内的其它几种转录因子的 DNA 结合活性。
来源:
克隆有人 APE 1 基因的重组 E. coli 菌株。
反应条件:
1X BalbBuffer 4
[50 mM KAc,20 mM Tris-Ac,10 mM Mg(Ac)2,1 mM DTT(pH 7.9 @ 25℃)],37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。
质保声明:
APE 1 核酸内切酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。更多信息请联系我们咨询。
单位定义:
1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能切割 20 pmol 含一个 AP 位点* 的 34 bp 寡核苷酸双链所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们咨询。
* AP 位点的创建方法如下:37℃ 条件下,用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)处理 20 pmol 含一个尿嘧啶碱基的 34 bp 寡核苷酸双链 2 分钟。
彗星试验的推荐稀释倍数:
1:103。详细步骤请联系我们咨询。
浓度:
10,000 units/ml。
名称:T4 RNA 连接酶 1(ssRNA 连接酶)
货号:SV1389
规格:5KU|1KU
特性:
连接单链 RNA 和 DNA
用 5´ -[32P] pCp 进行 RNA 3´ 末端标记
RNA 和 DNA 分子内及分子间的连接
合成单链寡脱氧核苷酸
蛋白质中掺入非天然氨基酸
概述:
催化 3´ →5´ 磷酸二酯键的形成,使核苷酸的 5´ -磷酸末端和 3´ -羟基末端连接,伴随着 ATP 水解为 AMP 和 PPi。作用底物包括单链 RNA、DNA 及二核苷焦磷酸。
来源:
携带 T4 RNA 连接酶 1 基因的 E. coli 菌株。
反应条件:
1X T4 RNA 连接酶缓冲液
[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃),10 mM MgCl2,1 mM DTT],加入 1 mM ATP,37℃ 温育。
热失活:65℃ 15 分钟或煮沸 2 分钟。
使用注意事项:
pCp 的连接需要加入终浓度为10%(v/v)的 DMSO。
随酶提供试剂:
10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
10 mM ATP(M0204)或 100 mM ATP(M0437)50% PEG 8000
质保声明:
无单链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 和磷酸酶污染。
单位定义:
1 单位指 37℃ 条件下,30 分钟内将 1 nmol 的 5´ -[32P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们咨询。
浓度:
10,000 或 30,000 units/ml。
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文献和实验,000 x G for 1 minute 2) For each HiBind® RNA Minicolumn, prepare the DNase I digestion reaction mix as follows: OBI DNase I Digestion Buffer 73.5ul RNase-free DNase I (20 Kunitz unites/ul) 1.5ul Total volume 75ul
assay) 0.5μl H2O 3)DNAse mix: made up near end of binding incubations. DNAse l(Worthington DPFF,Cat#LS0006330, lot #58A047,5mg) is 1mg/ml in150mM NaCl, 50% glycerol, store at ©20℃. Try 3 different [s] ofDNAse mix (A,B,C) 1,2 & 3μl stock DNAse1
DNase I 足迹试验 蛋白质 结合在DNA片段上,能保护结合部位不被DNase破坏,DNA分子经酶切作用后遗留下该片段(亦称“足迹”),进而可以确定它的序列。在电泳凝胶的放射性自显影图片上,相应于蛋白质结合的部位没有放射性标记条带。 DNase I足迹试验是一种鉴别RNA聚合酶等蛋白质在DNA上结合位点的方法,它不仅能找到与特异性DNA结合的目标蛋白,而且能告知目标蛋白结合在哪些碱基部位。足迹试验的方法较多,常用
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