WB抗体清除液(酸性)

特别提示：包括WB抗体清除液(酸性)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：WB抗体清除液(酸性)

产品货号：WB抗体清除液(酸性)
产品规格：500ml

Western Blot 抗体清除缓冲液(Stripping buffer)，用于Western Blot 中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western 中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后，有时还需要检测其它蛋白，通过使用抗体清除液，充分去除结合的一抗二抗，可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE 胶相比，不仅省时省力，而且可以消除重新上样而带来的误差，使可比性更强。

Western Blot 抗体清除缓冲液，经过多个抗体的检测试验，通常可以重复利用膜3-5 次。酸性抗体清除液适用于NC 膜和PVDF 膜上的抗体清除。

使用说明：
1. 在完成Western 化学发光检测后，蒸馏水中漂洗5 分钟。
2. 弃蒸馏水，加入适量的Western 一抗二抗去除液(酸性)，至少需把膜完全覆盖。在摇床上漂洗30-60 分钟。
3. 弃Western 抗体清除液,并吸尽残余液体。加入TBS、TBST 或PBS 漂洗3-4 次，每次在摇床上漂洗3-5 分钟。
4. 进行封闭(blocking)等Western 的后续操作。

注意事项：
1. 如多次重复使用同一张膜5 次以上，有可能会导致蛋白信号的减弱，建议膜重复使用不超过5 次。
2. 使用ECL 等类似的化学发光试剂进行的Western Blot 检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western Blot检测，例如DAB，NBT/BCIP 等，不适用于本试剂。
3. Western Blot 抗体清除缓冲液有轻微腐蚀性，使用时请注意防护。

除了WB抗体清除液(酸性),，我公司还供应以下相关产品：



名称：胆酸钠
货号：BTN131048
规格：5g
本产品用于制备脂质体和分离脂质。HPLC测定其纯度＞99%。低紫外吸收(1%溶液的A280＜0.08)。可以重生固定化的多粘菌素B 亲和柱。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

名称：水蛭素溶液(2万ATU/mL)
货号：BTN130542
规格：0.1mL
本产品为水蛭素水溶液，浓度为20000ATU/mL，工作浓度为150-200ATU/mL。水蛭素是从水蛭及其唾液腺中提取的含65个氨基酸残基的小分子蛋白，水蛭素对凝血酶有极强的抑制作用，是迄今为止所发现最强的凝血酶天然特异抑制剂。基因重组水蛭素是一种单链环肽化合物，相对分子量约为7000 道尔顿，是目前发现的最强的凝血酶特效抑制剂，其作用不依赖于抗凝血酶Ⅲ。

产品特点：
1.其优点是抗原性弱，少有过敏反应。
2. 不与血小板结合，极少导致血小板减少。
3. 稳定性好，毒性低。

储存条件：低温运输，-20℃保存。

活力单位定义：一个抑制单位ATU(anti-thrombin unit)指，37℃下，灭活一个NIH 单位凝血酶的量

使用方法：根据具体实验要求不同，加入所需要量的本产品。一般建议工作浓度为150-200ATU/mL。用户可以按照要求稀释本产品。后续按照常规操作即可。

名称：4%多聚甲*(含DEPC)
货号：SNM498
规格：500ml

名称：TRA-1-81免疫荧光试剂盒(IF)
货号：KFS021
规格：50T
本试剂盒可用于免疫荧光方法以显示人、大、小鼠来源的组织样本TRA-1-81抗原的分布。本试剂盒适用于常规福尔马林固定石蜡包埋切片、冰冻切片、培养固定的细胞爬片等。

注意事项:
1. 检测标本时需同时做阴性对照和阳性对照。
2. 在超过有效期的试剂盒中一种或多种试剂的活性可能降低，因此不得使用过期的试剂盒，不同批号间试剂盒也不能交叉混用。

名称：1×Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液
货号：KFS060
规格：1000ml
本产品作为蛋白电泳缓冲液，含有0.25M Tris、1.92M 甘氨酸。适用于变性聚丙*酰胺凝胶电泳。

为了您的安全和健康，请做好实验防护工作。如果需要电泳80KDa 以上的蛋白可以添加终浓度为0.1%的SDS。

储存：室温，有效期12个月。

名称：DAB法显色试剂盒(兔IgG)
货号：QN1161
规格：1盒
本试剂盒主要用于western blotting的DAB显色，含有抗兔IgG酶标二抗。

SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，经过底物显色以检测电泳分离的特异性的蛋白。

试剂盒组分：
封闭试剂————————————30g
10倍浓缩抗体稀释液———————50ml
酶标二抗————————————0.5ml，效价1:500～3000
20倍DAB浓缩显色液-———————5mlA+5mlB。

常规电泳转膜后:
1) 清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T 漂洗3 次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。
2) 按5g 封闭试剂加100ml 双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜，封闭液内，摇床震动，室温封闭30min。用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次5min。
3) 将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×（10ml 10×抗体稀释液加入90ml 双蒸水，混匀，可4℃保存三个月）。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4) 用1×的抗体稀释液稀释抗体。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。注：如果所加一抗不同，可在此步将膜沿电泳方向剪成条，分别作好标记，分开孵育。
5) 用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次5min。
6) 用稀释好的抗体稀释液稀释抗体。根据用量，按10ml 抗体稀释液加入10ul HRP 标记二抗的比例，配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中，加入二抗工作液，封口， 37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7) 用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次10min。
8) 配制DAB 显色：根据用量，取TBS-T 4ml，加入DAB 显色液A、DAB 显色液B 各200ul，混匀，加在膜正面，室温下显色。在目标条带显出后，而且背景未出时，放入水中终止显色。

注意事项：
1. 请根据一抗来源选择试剂盒。
2. western blotting DAB显色法操作简单，但其敏感性与ECL发光发有一定的差距，一般只适用于丰度较高的蛋白。
3. 可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深，可延长膜封闭时间，加长最终漂洗次数与时间。如果条带过弱，可延长抗体孵育时间。
4. 如果完全没有条带，请检查前期蛋白处理及实验过程， 如果确认无误，反复两次依旧无结果，请换用ECL发光法显色。
5. TBS-T（0.01M）配制方法：称取NaCl 8.5g ，Tris 1.21g ，用800ml 的双蒸水溶解，用盐酸调PH 到7.6，再加入0.5ml Tween－20，用双蒸水加至1000ml，混匀即可。（也可按照自己的配制习惯来配制）

储存条件：-20℃避光，有效期一年。