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大肠杆菌XL10-Gold化学感受态细胞

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  • 百奥莱博
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  • 2025年07月16日
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    • 英文名

      E.coli XL10-Gold Chemical Competent Cell

    • 保质期

      半年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      -80℃

    • 规格

      0.1mL*10

    特别提示:包括大肠杆菌XL10-Gold化学感受态细胞在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


    产品名称:大肠杆菌XL10-Gold化学感受态细胞
    英文名称:E.coli XL10-Gold Chemical Competent Cell

    产品货号:大肠杆菌XL10-Gold化学感受态细胞
    产品规格:0.1mL*10

     本产品是采用大肠杆菌XL10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。本产品适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定复制,还适合非甲基化DNA的转化。使用pUC19质粒检测,本产品转化效率可达108。本感受态细胞具有四环素和氯霉素抗性。

    菌株基因型:Tetr D(mcrA)183 D(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F- proAB lacIqZDM15 Tn10(Tetr)Amy Camr]

    储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。

    自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。

    使用方法:
    1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。
    以下实验以50μL感受态细胞为例。
    2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μL感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
    3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
    4. 每个离心管中加入450μL无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
    5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。

    注意事项:
    1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA总量较少,可取200-300μL转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
    2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
    3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

    除了大肠杆菌XL10-Gold化学感受态细胞,,我公司还供应以下相关产品:


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